古细菌种属鉴定 PCR Mix 1100 次原理
古细菌种属鉴定 PCR Mix 1100 次原理
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古细菌种属鉴定 PCR Mix 1100 次原理

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2017-01-19 16:36:11
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产品简介

古细菌种属鉴定 PCR Mix 1100 次原理运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

古细菌种属鉴定 PCR Mix 1100 次原理产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

古细菌种属鉴定 PCR Mix 1100 次原理合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

苏丹红7B
〖英文名称〗:Sudan red 7B;Fat Red 7B;Fat red bluish;Solvent Red 19 
〖其他名称〗:溶剂红19;脂肪红7B;邻甲氧基苯(偶氮-1)-2-萘酚;苏丹红G;苏丹红R 
〖CAS号〗:6368-72-5 
C24H21N5=379.46 
〖级别〗:BS
〖含量〗:≥80%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:波尔多色或暗红色至紫色结晶粉末。和水混溶,溶于丙同和苯,微溶于醇。溶点130℃ 
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT,避光
H33258荧光染料
〖英文名称〗:BBIH;Bisbenzimide H33258;HOE 33258;Hoechst 33258 
〖其他名称〗:赫斯特荧光燃料33258;甲嗪双苯咪酚;双苯咪唑;*己可碱;双苯并咪唑H33258三盐酸盐;荧光染料33258 
〖CAS号〗:23491-45-4 
C25H24N6O?3HCl=533.88
〖级别〗:For fluorescence
〖含量〗:≥98% (HPLC)
荧光性:λex 355 nm; λem 465 nm in TE buffer; DNA
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:黄色至黄绿色粉末,〖熔点〗>300℃。zui大吸收波长 343nm。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)荧光色素。荧光染色法和免疫荧光技术。用于与DNA键联的荧光染色剂。细胞遗传学研究的常用试剂,荧光染色细胞的DNA ,插入DNA的A-T区,具有低的细胞毒性,形成膜渗透性荧光DNA链
〖保存〗:2~8℃
H33342荧光染料

人源脱嘌呤 / 脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶    小鼠淋巴细胞分离液 1.092
T7 核酸内切酶 I    小鼠内皮细胞分离液 1.071
Tma 核酸内切酶 III    小鼠胰岛细胞分离液 1.072
核酸内切酶 IV    小鼠中性粒细胞分离液 1.100
核酸内切酶 III (Nth)    小鼠细胞分离液 1.070
核酸内切酶 V    心肌黄酶
T4 核酸内切酶 V    心肌细胞生长因子
核酸内切酶 VIII    辛甲基 β 葡糖苷
烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶    辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG)
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶    新生霉素
8- 氧代* DNA 糖基化酶    新生霉素溶液 ,50mg/mL
* -DNA 糖基化酶    星形胶质细胞生长因子
    Y2HGold 酵母菌种

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