单细胞裂解液 (RNA)1mL实验步骤合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
单细胞裂解液 (RNA)1mL实验步骤按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

单细胞裂解液 (RNA)1mL实验步骤产品介绍：
产

单细胞裂解液 (RNA)1mL实验步骤产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

〖保存〗：RT
间甲基红
〖英文名称〗：m-Methyl red；3-((4-(Dimethylamino)phenyl)azo)benzoic acid 
〖其他名称〗：对二甲氨基偶氮苯间羧酸；3-((4-(二甲基氨基)苯基)偶氮)苯甲酸；对二甲氨基苯偶氮苯甲酸
〖CAS号〗：20691-84-3 
C15H15N3O2=269.30 
〖级别〗：IND
pH变色域：2.0(红)～4.0(黄)
被溴氧化试验：合格
乙醇溶解试验：合格
〖灼烧残渣〗：≤0.3%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：红棕色粉末。溶于乙醇，几乎不溶于水
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)酸碱指示剂

单细胞裂解液 (RNA)1mL实验步骤LBA4404 农杆菌感受态细胞    *溶液，10mg/mL
AH109 酵母感受态细胞    碱性胶电泳液 ,10×
EGY48 酵母感受态细胞    MDS 42T7lac 菌种
NMY51 酵母感受态细胞    干粉型 LB-Lennox 培养基
Y187 酵母感受态细胞    干粉型 2×YT 培养基
Y2HGold 酵母化学感受态细胞    干粉型 SB 培养基
T1 感受态细胞    干粉型 SOC 培养基
植物 RNA 提取高盐溶液    干粉型 TB 培养基
克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）    自诱导培养基 (lac 启动子 )
Flemming 固定液    穿刺培养基
Orth 固定液    菌种保存液
BL21 感受态细胞    菌种保存液
M15 感受态细胞    高 pH 缓冲液套装
OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞    中 pH 缓冲液套装
XL10-Gold 感受态细胞    低 pH 缓冲液套装
非蛋白型 Western 封堵液    5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP)
脑心浸液    四氮唑蓝 (NBT)
哺乳动物双杂交试剂盒    PMSF 溶液，10mg/mL
柱式石蜡包埋组织 DNAout2.0（二代测序）    *抑制剂，10mg/mL
柱式微生物基因组 DNAout     *抑制剂溶液，1 mg/mL
单细胞全转录组扩增试剂盒     亮抑蛋白酶肽溶液，10 mg/mL
酚 - 混合液 (RNA 提取 )    EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白
nnexin V-PE·7-AAD）