真菌种属鉴定 PCR Mix 5100 次实验步骤产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
真菌种属鉴定 PCR Mix 5100 次实验步骤合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

*试纸
〖英文名称〗：Phenolphthalein test paper
规格：100张/盒
pH变色范围：8.2(无色)～10.0(红色)
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：白色纸条。是将滤纸浸入配制好的*溶液中，经浸渍、干燥、切条而得。遇酸无色，遇碱呈红色
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)测定溶液的pH 
〖保存〗：RT
*络合指示剂
〖英文名称〗：Phenolphthalexone；Phenolphthalein-3,3′-bis(methyliminodiacetic acid)；3,3′-Bis-｛［bis(carboxymethyl)amino］methyl｝phenolphthalein
〖其他名称〗：*-3,3’-双-(亚甲氨基二乙酸) 
〖CAS号〗：25296-54-2
C30H28N2O12=608.56
〖级别〗：IND
对锶络合试验：合格
水溶解试验：合格
游离*：合格
〖灼烧残渣〗：≤1.0%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：近似白色或微黄色粉末。溶于乙醇、乙迷和氨水，不溶于水
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)络合指示剂，测定钙

G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物    YPD 液体培养基
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物    YPDG 液体培养基
RNase 抑制剂 ( 小鼠源 )    YPG 液体培养基
p19siRNA 结合蛋白     亚氨二乙酸介质
p19miRNA 检测试剂盒     亚精胺 ( 精脒 )
ATP 发光法细胞活力检测试剂盒    亚精胺三盐酸盐
ADP/ATP 发光法细胞活力检测试剂盒    亚硫酸氢盐 DNA 修饰试剂盒
单细胞裂解液 (DNA)    亚硫酸盐修饰的 DNA
单细胞裂解液 (RNA)    亚铁 ( 三水合 )
单细胞悬浮液    *
胚胎裂解液    *
显影定影套装    *
显影粉    盐酸胍
定影粉    盐酸胍溶液，8M
荧光尺    *
凋亡 DNAout    *干粉
 ( 低 pH)