单细胞全转录组扩增试剂盒 24 次原理
单细胞全转录组扩增试剂盒 24 次原理
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单细胞全转录组扩增试剂盒 24 次原理

单细胞全转录组扩增试剂盒 24 次原理

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2017-01-19 16:03:22
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产品简介

单细胞全转录组扩增试剂盒 24 次原理运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

单细胞全转录组扩增试剂盒 24 次原理产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
单细胞全转录组扩增试剂盒 24 次原理产品介绍:

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

邻菲啰啉盐酸盐
〖英文名称〗:o-Phenanthroline hydrochloride 
〖其他名称〗:1,10-菲啰啉盐酸盐;邻菲罗啉盐酸盐;盐酸邻菲罗啉;1,10-邻二氮杂菲盐酸盐一水合物;1,10-菲啉盐酸盐;1,10-菲咯啉单盐酸单水合物;苯奈林;邻菲咯啉单盐酸单水合物
〖CAS号〗:3829-86-5 
C12H8N2?HCl?H2O=234.68 
〖级别〗:AR
〖含量〗:≥99.5%
对〖铁〗络合物摩尔吸收系数ε/(L/cm?mol):≥11000
〖干燥失重〗:≤7.8% 
外观:合格
水溶解试验:合格
〖灼烧残渣〗:≤0.05% 
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:无色或白色结晶粉末。对光敏感。溶于水和乙醇
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)亚〖铁〗的光度测定。银、铜、〖锌〗、镉等离子的掩蔽剂。钯、锰等离子的沉淀剂。指示剂
〖保存〗:RT,避光
玫瑰红三羧酸铵
〖英文名称〗:Aluminon;Aurintricarboxylic acid triammonium salt;C.I. 43810
〖其他名称〗:铝试剂;玫红三羧酸铵;5-[(3-羧基-4-羟基苯基)(3-羧基-4-氧代-2,5-环己二烯-1-亚基)甲基]-2-羟基苯甲酸三〖铵盐〗;金精三羧酸铵;金红*酸铵;2-(亚水杨基氨基)酚;水杨叉邻氨基酚;水杨缩邻氨基酚
〖CAS号〗:569-58-4 

小鼠抗 Trx 标签蛋白单抗     电泳尿素
兔抗山羊 IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记    DNA 尿素 -PAGE 上样液
山羊抗小鼠 IgG(H+L),异硫氰酸荧光素标记    DNA 尿素 -PAGE 上样液
山羊抗小鼠 IgG(H+L),异硫氰酸荧光素标记    DNA 非变性 PAGE 上样液
山羊抗兔 IgG(H+L),异硫氰酸荧光素标记    DNA 非变性 PAGE 上样液
山羊抗兔 IgG(H+L),异硫氰酸荧光素标记    电泳甲叉双丙烯酰胺 
基因转染增强剂    Western 印迹膜封膜液 ( 尼龙膜 )
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-EGFP·PI)    电泳过硫酸铵
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-EGFP·PI)    电泳 TEMED
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-PE·7-AAD)     SDS 溶液 ,10%,电泳
双染细胞凋亡

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