GTP 溶液,100mM0.25mL实验步骤
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GTP 溶液,100mM0.25mL实验步骤

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具体成交价以合同协议为准
2017-01-19 15:56:34
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产品简介

GTP 溶液,100mM0.25mL实验步骤运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

GTP 溶液,100mM0.25mL实验步骤产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
GTP 溶液,100mM0.25mL实验步骤产品介绍:

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

〖其他名称〗:丽春红BS;酸性红66;比布列西猩红;猩红B;6-(2-羟基萘偶氮)-3,4'-偶氮二苯磺酸钠;新品酸性红;C.I.溶剂红24;邻甲苯偶氮基邻甲苯偶氮基-β-萘酚;藏花猩红;新品酸性橙
〖CAS号〗:4196-99-0 
C22H14N4Na2O7S2=556.48
〖级别〗:BS
〖含量〗:≥70%
zui大吸收波长:506~510nm
吸光度试验:530~540
吸光度之比(250nm/260nm):0.95~1.00
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:红色至褐色粉末,溶于水(30mg/mL),溶于水呈橙红色溶液,微溶于乙醇和乙二醇乙迷,不溶于多数有机溶剂。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT
间甲酚紫
〖英文名称〗:m-Cresol purple;Cresol Purple
〖其他名称〗:间甲*紫;间甲酚磺酞;间甲酚磺酰酞;3,3'-二甲基*;灿烂甲酚紫;甲*紫;甲酚固紫;间甲*紫
〖CAS号〗:2303-01-7 
C21H18O5S=382.43
〖级别〗:IND 

10 μL RNase-free 白吸头 ( 盒装已灭菌带芯长尖 )    柱式植物油 DNAout
200 μL RNase-free 黄吸头 ( 袋装 )    柱式植物 RNA-DNA 双提试剂盒
NdeI    水样病毒沉淀剂
200 μL RNase-free 黄吸头 ( 袋装带芯 )    柱式真菌 RNA-DNA 双提试剂盒
NotI    柱式细菌 RNA-DNA 双提试剂盒
200 μL RNase-free 黄吸头 ( 盒装 )    柱式软骨 RNAout
200 μL RNase-free 黄吸头 ( 盒装已灭菌 )    尼龙膜,13×20cm
PstI    PVDF 膜,0.45μm,13×20cm
200μLRNase-free 黄吸头 ( 盒装已灭菌带芯 )    DNA  SDS 溶液,10%
PvuII    DNA 乙酸钠,pH

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