CTP 溶液，100mM0.25mL原理合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
CTP 溶液，100mM0.25mL原理按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

产品介绍：

产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：紫色或棕色结晶，溶于水呈桔黄色，微溶于*溶液，不溶于醇，溶液不稳定，使用时须用新鲜配制。〖熔点〗>300℃
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)检定钡、锶、钪、〖铅〗、锡和〖硫酸盐〗，在钡及〖硫酸盐〗容量测定中作指示剂
〖保存〗：RT
5-硝基邻菲啰啉
〖英文名称〗：5-Nitro-1，10-phenanthroline；5-Nitro-1,10-phenanthroline 
〖其他名称〗：5-硝基-1,10-菲啰啉；5-硝基-1,10-菲咯啉；5-硝基-1,10-邻二氮杂菲；5-硝基邻二氮杂菲；5-硝基-1,10-菲咯啉；5-硝基-1,10-菲罗啉；5-硝基-1,10-邻菲罗啉
〖CAS号〗：4199-88-6
C12H7N3O2?xH2O= 225.20 (anhydrous basis)
〖级别〗：AR
〖含量〗：≥98.0%
〖熔点〗：200～203℃
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：黄色或橙色结晶粉末
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT

胎牛血清（北美特）    单细胞全基因组扩增试剂盒
真空抽滤盒    福林酚试剂
ApaI    石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒
0.5 mL RNase-free 离心管    通用型全基因组扩增试剂盒
BamHI    单孢子全基因组扩增试剂盒
1.5 mL RNase-free 离心管    环状 DNA 全基因组扩增试剂盒
BglII    电泳橙黄 G 溶液
2.0 mL RNase-free 离心管    Benzonase 核酸酶
DpnI    KOD DNA 聚合酶
10 μL RNase-free 白吸头 ( 袋装 )    RAPD PCR 试剂盒 ( 含银染 )
EcoRI    即用型易错 PCR 试剂盒
10 μL RNase-free 白吸头 ( 袋装长尖 )    线状 DNA 清除剂
10 μL RNase-free 白吸头 ( 袋装带芯 )    改良 Lowry 法蛋白定量试剂盒
EcoRV    玻璃匀浆器 ,1mL
10 μL RNase-free 白吸头 ( 袋装带芯长尖 )    玻璃匀浆器 ,2mL
HindIII    玻