单细胞悬浮液1mL实验方法
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具体成交价以合同协议为准
2017-01-19 16:05:47
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产品简介

单细胞悬浮液1mL实验方法运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

单细胞悬浮液1mL实验方法产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
单细胞悬浮液1mL实验方法产品介绍:

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

灵敏度试验:合格
〖灼烧残渣〗(以〖硫酸盐〗计):≤20.0%
水溶解试验:合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:棕色粉末,能溶于热水,冷却后成红棕色溶液,稍溶于醇,并呈棕光品红色;微溶于丙同。遇过量盐酸生成棕紫色沉淀;在浓硝酸中呈枯桔黄色;遇氢氧呈深蓝色,后变红色,溶于浓硫酸成蓝色溶液,稀释后生成棕色沉淀。水中溶解度(90℃)为25g/L。染色时遇铜、〖铁〗时色光影响较大。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)测定水硬度用指示剂,金属络合指示剂,测定钙、镁、钡、姻、锰、〖铅〗、钪、锶、〖锌〗和锆
〖保存〗:RT
铬蓝R
〖英文名称〗:Eriochrome blue black R;Mordant Black 17;Acid chrome blue black;Palatine chrome black 6BN;Calcon;Chrome blue black R;Anthracene blue black;Solochrome dark blue 
〖其他名称〗:依来铬蓝R;酸性媒介R;酸性铬蓝R;酸性媒介蓝;茜素蓝;铬兰R;钙试剂;媒介17;3-羟基-4-(2-羟基-1-萘偶氮)-1-萘磺酸钠;宫殿染料;钙紫红素
〖CAS号〗:2538-85-4 
C20H13N2NaO5S=416.39 
〖级别〗:IND
灵敏度试验:合格
乙醇溶解试验:合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:棕色或深棕色粉末,溶于水和乙醇。水溶液呈紫色溶液,加盐酸于水溶液中有棕色沉淀,醇溶液为蓝红色,浓硝酸溶液为黄色,氢氧溶液为枣红色,硫酸液为蓝色,用水稀释析出红色沉淀。zui大吸收波长569nm。有刺激性
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)络合指示剂。测定钙、镁、镉、锰和〖锌〗。荧光分析测铝。测定水硬度

酸水解酪素     - 混合液
DMEM( 高糖 )    酚 -  - 混合液 (RNA 提取 )
DMEM( 低糖 )    酚 -  - 混合液 (DNA 提取 )
供体马血清    Earle 溶液
弗氏不*佐剂    杜氏 PBS 缓冲液 ,10×
DH10B 感受态细胞    溴化乙锭干粉 (EB)
XL2-Blue 感受态细胞    SSPE 溶液 ,20×
BL21-CodonPlus(DE3) 感受态细胞    超快蛋白银染试剂盒
Rosetta 感受态细胞    质谱兼容型蛋白银染试剂盒
AGL1 农杆菌感受态细胞    BLOTTO 溶液
EHA105 农杆菌感受态细胞    干粉型 SOB 培养基
GV3101 农杆菌感受

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