天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒80 次实验方法
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天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒80 次实验方法

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2017-01-19 16:02:30
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产品简介

天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒80 次实验方法运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒80 次实验方法合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒80 次实验方法按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

产品介绍:

产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

C22H23N3O9=473.44 
〖级别〗:AR
灵敏度试验:合格 
溶解试验:合格
〖灼烧残渣〗:≤0.2%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:黄棕色或棕红色粉末。易溶于水,微溶于乙醇,几乎不溶于乙迷、丙同和氯方。〖熔点〗220~225℃(分解)。zui大吸收波长 522(450)nm。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)测定水、食物及组织中的铝。光度测定铝、铍和氟化物、镓、钪。用于铝的纸色谱
〖保存〗:RT,避光
玫瑰红6G
〖英文名称〗:Rhodamine 6G;Basic Red 1;Rhodamine 590;Rhodamine 6GX;6GDN;Rhodyle 4G;Brilliant pink 5G;Calcozine red 6G extra;C.I. 45160  
〖其他名称〗:罗丹明6G;罗丹明590;蕊香红6G;若丹明6G;黄光碱性蕊香红;碱性红1;9-[2-(乙氧羰基)苯基]-3,6-二(乙氨基)-2,7-二甲基氯化占吨翁;染料索引45160
〖CAS号〗:989-38-8 
C28H31ClN2O3=479.02
〖级别〗:BS
生物染色试验:合格
水溶性试验:合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:红色或黄棕色粉末。溶于水呈猩红色带绿色荧光;溶于醇呈红色带黄色荧光或黄红色带绿色荧光。〖熔点〗290℃

双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-APC·7-AAD)     RNase-free 异硫氰酸胍溶液 ,5M
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-APC·7-AAD)     IPTG 干粉
细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-APC)    X-Gal 干粉
细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-APC)    RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10%
细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-PE)    DNA 异硫氰酸胍溶液,5M
细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-PE)    AFLP 试剂盒 (EcoRI-MseI)
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 488·PI)     RNase-free 盐酸胍溶液 ,8M
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 488·PI)     RNase-free 氯化锂溶液 ,10M
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 555·7-AAD)    一站式*期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 555·7-AAD)    一站式*期 SDS-PAGE 电泳套装 (2-30KD)
细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 594)    *期 SDS-PAGE 配胶液
细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 594)    *期 SDS-PAGE 还原剂
D-Hanks 溶液

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