即用型封堵液 (Nylon )50mL实验方法磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

即用型封堵液 (Nylon )50mL实验方法使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
即用型封堵液 (Nylon )50mL实验方法产品介绍：

即用型封堵液 (Nylon )50mL实验方法磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

pH变色域：10.0（黄）～12.0（红）
乙醇溶解试验：合格
灵敏度试验：合格
水溶解试验：合格
〖灼烧残渣〗(以〖硫酸盐〗计)：18.0～24.0%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：棕黄色粉末。溶于水，其溶液呈棕黄色
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)酸碱指示剂，金属着色剂。常用1%钠盐作指示剂
〖保存〗：RT
酸性茜素蓝B
〖英文名称〗：Acid alizarin blue B
〖其他名称〗：媒染蓝B；3-[(5-氯-2-羟基苯基)偶氮]-4,5-二羟基-2,7-萘二磺酸二钠盐；媒介蓝13；铬蓝SE；酸性铬深兰；铬兰SE；酸性媒介溶蓝；酸性铬深蓝；酸性媒介深蓝
〖CAS号〗：1058-92-0
C16H9ClN2Na2O9S2=518.81
〖级别〗：BS
红外光谱〖鉴别〗：合格
λmax：552～556nm(甲醇)
λmax：526.～530nm(甲醇)
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：蓝黑色至棕黑色带金属光泽粉状或深蓝色粉末。溶于水呈品红色，溶于溶纤素，稍溶于乙醇。在浓硫酸中呈溶蓝色，稀释后呈品红色、在浓硝酸中呈棕光红色溶注估烧碱液中呈红光蓝色溶液。其水溶液，加浓盐酸呈品红色、加浓氢氧呈蓝色。染色时遇铜、〖铁〗，色光变化大。水中溶解度（80℃）50g/L
基苯偶氮)-7-(3-乙酰基苯偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸

即用型封堵液 (Nylon )50mL实验方法锰盐营养琼脂250g用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验
牛津琼脂(OXA)基础 Oxford Agar Base 用于单增李氏菌的选择性分离(SN标准)
GAM肉汤 Anaerobic Broth 250克 用于专性厌氧菌培养
发根农杆菌培养基250g/瓶incubationmedia发根农杆菌培养基250g/瓶
BrainHeartinfusionAgar
Mn2+NutrientAgar
缓冲李氏菌增菌肉汤基础 Buffered Listeria Enrichment Broth 用于李氏菌的增菌培养(FDA标准)
乳糖-明胶培养基 Lactose-Gelatin Medium 250克 产气荚膜梭菌明胶液化试验
大肠杆菌显色培养基l用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时，显兰色incubationmedia大肠杆菌显色培养基l用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时，显兰色
Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂) 250g 用于粪链球菌的选择性分离和计数(SN标准)
卵黄琼脂基础250g加入卵黄，用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养
PALCAM琼脂 PALCAM Agar 用于单增李氏菌选择性分离(FDA标准)
TSC琼脂 TSC Agar 250克 产气荚膜梭菌的平板计数
大肠菌显色培养基l用于快速、准确检测大肠菌大肠菌培养24小时，显兰色incubationmedia大肠菌显色培养基l用于快速、准确检测大肠菌大肠菌培养24小时，显兰色
PfizerEnterococcusSelectiveAgar
EggYolkAgarBase
Hal