显影粉1袋实验步骤磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

显影粉1袋实验步骤使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
产品介绍：

磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

Cephalexinmonohydrate*Ⅳ1毫克BR，500u/mg
L-*二钠盐，英文名或英文缩写：L-Tyrosine disodium salt，级别：昆虫细胞培养级，98%，规格：25克
CaseinNasalt酪蛋白钠100毫克BR，200u/mg，粉末
L-*甲酯盐酸盐，英文名或英文缩写：H-Trp-OMe•HCl，级别：特纯，98.0%，规格：5克
CAMP环腺苷酸1克试剂级，98.5%
N-乙酰-L-*乙酯一水合物，英文名或英文缩写：ATEE，级别：BR，98%，规格：5克
Calciumchlorideanhydrous无水氯化钙1克CP，98%
N-叔丁氧羰基-*，英文名或英文缩写：BOC-Glycine，级别：BR，99%，规格：1公斤
Buffersolution缓冲液100克高纯，98%
γ-L-谷氨酰-1-奈酰，英文名或英文缩写：γ-L-Glutamyl-α-naphthylamide，级别：BR，98%，规格：10克
Borneol2-莰醇10克AR，98%
N-(γ-L-谷氨酰)-α-奈，英文名或英文缩写：N-(r-L-Glutamyl)-1-naphthylamide，级别：BR，规格：25克
基-L-天冬酰，英文名或英文缩写：Z-Asn-OH，级别：BR，98%，规格：250毫克

通用型 RT-LAMP 试剂盒    50 次    苔素
LAMP 扩增阳性对照    50 次    β- 硫代*酸
LAMP 可见光染料    1mL    D- 核糖
核酸稀释液，测 OD     100mL    D- *
天净沙 Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒    20 次    菌素 D
天净沙 SPIA 扩增试剂盒 ( 用于扩增 DNA 模板 )    20 次    乙酰水杨酸
T7 体外转录试剂盒    50 次    抗坏血酸
T7 体外转录试剂盒    50 次    胸腺嘧啶核苷
SP6 体外转录试剂盒    50 次    D- *
SP6 体外转录试剂盒    50 次    兔肌动蛋白
T3 体外转录试剂盒    50 次    L- 羟基*
T3 体外转录试剂盒    50 次    亮绿 SF( 淡黄 )
m7G(5′)ppp