即用型封堵液 (NC ) 50mL价格磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

即用型封堵液 (NC ) 50mL价格使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
即用型封堵液 (NC ) 50mL价格磷酸化反应标记：

A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

酸性肉汤250g用于酸性缺罐头食品商业无菌检验
Fraser培养基 Fraser Medium 用于李氏菌的增菌培养
产芽孢肉汤 Sporulation Broth 250克 产气荚膜梭菌的产芽孢培养
TBX培养基l用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时，显兰色incubationmediaTBX培养基l用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时，显兰色
MEIMedium
AcidBorth
LPM琼脂 LPM Agar 用于单增李氏菌选择性分离(加入七叶苷和柠檬酸铁铵)(FDA标准)
Hektoen琼脂培养基 Hektoen Enteric Agar 250克 用于沙门氏菌属和志贺菌属的分离培养
细菌总数显色培养基250用于快速、准确检测细菌总数，培养24小时，细菌显红色incubationmedia细菌总数显色培养基250用于快速、准确检测细菌总数，培养24小时，细菌显红色
肠球菌琼脂(胆汁七叶苷叠氮钠琼脂) 250g 用于食品和水中肠球菌的计数。
麦芽浸膏汤200g用于酸性罐头食品商业无菌检验
改良缓冲蛋白胨水(MBP) Modified Buffered Peptone Water 用于单增李氏菌前增菌培养(SN标准)
克氏铁琼脂 KIA 100克 肠杆菌科的初步鉴定
O培养基l用于O显色培养incubationmediaO培养基l用于O显色培养
BileAesculinAzideAgar
MaltExtractBroth
EB增菌液 用于单增李氏菌选择性增菌培养(SN标准)
脱氧胆酸钠琼脂 DCLA 250克 大肠菌的平板测定以及肠道菌的选择性培养
沙门氏菌显色培养基l用于沙门氏菌的显色培养incubationmedia沙门氏菌显色培养基l用于沙门氏菌的显色培养
6.5%NaCl葡萄糖琼脂 250g 用于肠球菌高盐耐受生长试验
疱肉培养基基础250g加入牛肉粒，用于肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验
UVM培养基 UVM Medium 用于李氏菌的增菌培养(MERCK方法)
中国蓝琼脂 China Blue Lactose Agar 250克 弱选择性培养基，肠道致病菌选择分离
李斯特氏菌显色培养基l用于李斯特氏菌的显色培养incubationmedia李斯特氏菌显色培养基l用于李斯特氏菌的显色培养
6.5%NaClDextroseAgar
CookedMeatMediumBase
LM-137琼脂 LM-137 Agar 用于滤膜法单增李氏菌选择性分离(NEOGEN标准)
胆盐硫乳琼脂培养基 DHL Agar 250克 沙门氏菌和志贺氏菌的分离培养
金黄色葡萄球显色培养基l用于*的显色培养incubationmedia金黄色葡萄球显色培养基l用于*的显色培养
哥伦比亚血琼脂基础(改良) 250g 用于链球菌等苛求菌培养
疱肉牛肉粒加入疱肉基础，配成疱肉培养基
MFB培养基 MFB Medium 用于李斯特氏菌的选择性增菌培养
*琼脂 Gentamycin Agar 250克 用于霍乱弧菌的分离培养
霉菌和酵母菌显色培养基l用于霉菌和酵母菌的显色培养incubationmedia霉菌和酵母菌显色培养基l用于霉菌和酵母菌的显色培养
乙基紫叠氮钠肉汤(litsky肉汤) 250g 用于链球菌增菌培养
DriedMeatParticle
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉汤(TSB-YE) Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 用于单增李氏菌增菌培养
MH琼脂 MHA 250克 抗菌素药物敏感性试验
弧菌显色培养基l用于弧菌的显色培养，副溶血性弧菌显蓝色，其它弧菌显无色。incubationmedia弧菌显色培养基l用于弧菌的显色培养，副溶血性弧菌显蓝色，其它弧菌显无色。
叠氮葡萄糖肉汤 250g 用于链球菌增菌培养
消毒灭菌效果评价培养基
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆琼脂(TSA-YE) Trypticase Soy-Yeast Extract Agar 用于单增李氏菌的分纯，培养，可用于做7%羊血琼脂
MH肉汤 MHB 250克 用于抗菌素药物敏感性试验
坂崎杆菌显色培养基l用于坂崎杆菌的显色培养，坂崎杆菌显蓝色，其它肠杆菌显无色。incubationmedia坂崎杆菌显色培养基l用于坂崎杆菌的显色培养，坂崎杆菌显蓝色，其它肠杆菌显无色。
草酸钾兔血浆 0.2ml*20 用于溶血性链球菌的检验
溴甲酚紫蛋白胨培养液250g用于压力蒸气消毒过程监测指示菌(嗜热脂肪杆菌芽孢)的培养及消毒效果测定
血液琼脂基础 Blood Agar Base 供分离营养要求较高的致病菌用，后加血液制成血平板
抗生素1号培养基(PH6.5-6.6) Antibiotic Agar 250克 磺卞*等的效价测定
尿道定位显色培养基l用于分离和鉴别常见尿道致病菌incubationmedia尿道定位显色培养基l用于分离和鉴别常见尿道致病菌
PotassiumOxalateInRabbitPlasma

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