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暗盒 (5×7 英寸 )1个价格使用方法:
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂:7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液: 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5~10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷无水乙醇,-20℃放置 30~60 分钟。
7. 离心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注:通过第 5~8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP,如要 *将其除去时,乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时,请在第
8 步之后进行。
暗盒 (5×7 英寸 )1个价格产品介绍:
暗盒 (5×7 英寸 )1个价格磷酸化反应标记:
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂:TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量离心管中制备下列反应液: 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//(25:24:1),充分混匀。
5. 离心,取上层(水层)移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui终浓度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷无水乙醇,-20℃放置 30~60 分钟。
9. 离心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
暗盒 (5×7 英寸 )1个价格磷酸化反应(前反应):
1. 在微量离心管中制备下列反应液:
2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记:
当掺入水平很低的时候,需要使用本步骤,即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱(需另购)对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好,它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5~10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。
AMV cDNA *链合成试剂盒 30 次 吸附树脂 XAD7
miRNA cDNA *链合成试剂盒 25 次 D- 果糖 -1,6- 二*
miRNA 荧光定量检测试剂盒 25 次 *
cDNA 第二链合成试剂盒 30 次 荧光胺
一管式双链 cDNA 合成试剂盒 10 次 萘啶酮酸
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL 5μg 弹性蛋白酶 ( 猪胰 )
6nt 随机引物,0.5μg/μL 5μg 蛋白酶 K
10nt 随机引物,0.5μg/μL 5μg DEAE 葡聚糖凝胶 A-50
6nt 随机引物 ( 抗水解 ),0.5mM 100μL 5- 磷酸吡哆醛,一水
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq) 50 次 苏丹 B
两管式 RT-PCR 试剂盒 (AMV-Taq) 50 次 对硝基苯磷酸二钠盐
单酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (Tth) 50 次 萘酚 AS-TR 磷酸盐
双酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq) 50 次 荧光增白剂 28
暗盒 (5×7 英寸 )1个价格D-Cysteine(S)-2-氨基-3-巯基丙酸25克BR,99%
VISIGLO™APCHEMILUMINESCENTSUBSTRATE碱性嶙酸酶化学发光底物超纯级透明无色液体COLDsigma
N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐
EZ-VISION®ONE,DNADYEASLOADINGBUFFER6XEZvision DNA染料(一条指示带)生物技术级深红色微粘稠液体COLDsigma
D-(+)-SorboseD(+)-山梨糖30次/100ul/支AR
RIBOZOL™RNAEXTRACTIONREAGENTRiboZol RNA 抽提试剂生物技术级粉色至暗粉色透明液体RTsigma
Curdlan可得然胶1克高纯,98%
X-GAL-IPTGREADYSOLUTIONX-GAL-IPTG 即用型溶液生物技术级透明,无色至黄色液体COLDsigma
CRH肌酸酶/肌氨酸酶25毫克精制级,20u/ul
COLUMNREGENERATIONKIT柱再生试剂RTsigma
醇,英文