X 光片 (5×7 英寸 )1盒图片磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

X 光片 (5×7 英寸 )1盒图片使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
X 光片 (5×7 英寸 )1盒图片产品介绍：

X 光片 (5×7 英寸 )1盒图片磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

dITP 溶液，100mM    0.5mL    健那绿 B
dATP 溶液，2.5mM    2mL    4’,6- 二脒基 -2- 苯基吲哚
dATP 溶液，100mM    0.5mL    3- 异丁基 -1- 甲基黄嘌呤
dTTP 溶液，2.5mM    2mL    咪唑
dTTP 溶液，100mM    0.5mL    n- 辛基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷
dGTP 溶液，2.5mM    2mL    苦杏仁苷
dGTP 溶液，100mM    0.5mL   化硝基四氮唑兰
dCTP 溶液，2.5mM    2mL    噻唑兰
dCTP 溶液，100mM    0.5mL    2,3,5化三苯基四氮唑
Deaza dGTP    0.4mL    吩嗪硫酸甲酯
双脱氧 dNTP 套装    40uL×4    3- 三 ( 羟甲基 ) 甲基 -3- 氨基丙烷磺酸
dNTP 和引物清除剂    100 次    脱氧胆酸钠

X 光片 (5×7 英寸 )1盒图片OCTYL-THIOGLUCOSIDE辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷超纯级白色固体FRZsigma
Gold金粉500克BR，90%
TAPS,SODIUMSALTTAPS Na生物技术级白色粉末RTsigma
Glycinetertbutylesterhydrochloride盐酸*叔丁酯5克BR，98%
AGAR,BACTERIOLOGICAL细菌琼脂细菌学级白色至淡奶油粉末RTsigma
GinsenosideRf人参皂甙Rf5克色固
YEASTEXTRACT,BACTERIOLOGICAL酵母粉细菌学级粉末RT不sigma
Gallicacid3,4,5-三羟基苯酸25克BR
SUPERBROTH,POWDER超级肉汤, 粉末生物技术级RT不sigma
Fmoc-Thr(tBu)-OHFmoc-O-叔丁基-L-*5克特纯，98%
HMEDIUMBROTHH 培养基肉汤生物技术级浅米黄色粉末RT不sigma
Fmoc-D-Ala-OHN-芴甲氧羰酰基-D-*25克特纯，98%
WESTERNMAX™ALKALINEPHOSPHATASECHROMOGENICDETECTIONKIT,MOUSE碱性嶙酸酶发光检测试剂盒,小鼠生物技术级COLDsigma
Ferulicacid3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸5克AR，99%
HYDROXYPROPYLMETHYLCELLULOSE羟丙基甲基纤维素高纯级白色粉末RTsigma
FastgreenFCF坚牢绿FCF100克BR，98%
MONENSIN,SODIUMSALT莫能菌素,钠盐超纯级白色至微黄色粉末FROZENsigma
henylglyc