超快核酸转膜试剂盒5次实验步骤使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
超快核酸转膜试剂盒5次实验步骤产品介绍：

磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

WL营养琼脂250g用于啤酒和发酵产品中酵母菌和细菌的计数
TTC营养琼脂 250(g) incubation media TTC营养琼脂 250(g)
NZYM肉汤 NZYM Broth 100克 BR
肉浸液肉汤培养基250用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和*的增菌培养(GB标准)incubationmedia肉浸液肉汤培养基250用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和*的增菌培养(GB标准)
我妻氏血平板9cm 10个/包 用于神奈川现象试验
WLNutrientAgar
LB肉汤 250(g) incubation media LB肉汤 250(g)
NZM琼脂 NZM Agar 100克 BR
叠钠葡萄糖肉汤250用于链球菌的增菌培养incubationmedia叠钠葡萄糖肉汤250用于链球菌的增菌培养
WagstsumaAgarPlate(9cm)
改良沙氏琼脂培养基250g用于真菌培养
LB琼脂 250(g) incubation media LB琼脂 250(g)
NZM肉汤 NZM Broth 100克 BR
KF链球菌琼脂于链球菌的选择性分离及计数(SN标准)incubationmediaKF链球菌琼脂于链球菌的选择性分离及计数(SN标准)
霍乱红胨水 20支 霍乱弧菌的霍乱红试验
Sabouraud'sAgar，Modified
玉米粉琼脂培养基 250(g) incubation media 玉米粉琼脂培养基 250(g)
NZCYM琼脂 NZCYM Agar 100克 BR
LIM培养基250用于链球菌的分离培养(Japan方法)incubationmediaLIM培养基250用于链球菌的分离培养(Japan方法)
BTB培养基 250g 用于弧菌选择性增菌培养
沙氏BHI琼脂250g用于真菌检测
高氏一号合成培养基 250(g) incubation media 高氏一号合成培养基 250(g)
NZCYM肉汤 NZCYM Broth 100克 BR
BETA-SSA琼脂250用于链球菌的选择性分离培养(ACUMEDIA方法)incubationmediaBETA-SSA琼脂250用于链球菌的选择性分离培养(ACUMEDIA方法)
BTB，Medium
SabouraudBHIAgar
L型细菌高渗糖* 250(g) incubation media L型细菌高渗糖* 250(g)
疱肉牛肉粒 Dried Meat Particle 100克 加入苞肉基础中配成苞肉培养基
小肠结肠炎耶尔森氏菌incubationmedia小肠结肠炎耶尔森氏菌
PAC斜面培养基 250g 用于弧菌的保存
高渗真菌学琼脂250g用于高渗食品中酵母菌和霉菌检测
L型细菌高渗盐* 250(g) incubation media L型细菌高渗盐* 250(g)
SOB肉汤 SOB Broth 250克 BR
改良Y培养基250用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌(GB标准)incubationmedia改良Y培养基250用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌(GB标准)
PlateCountAgar
OsmophilicMycophileAgar
叠钠葡萄糖肉汤 250(g) incubation media 叠钠葡萄糖肉汤 250(g)
SOB琼脂 SOB Agar 250克 BR
改良磷酸盐缓冲液PSB250用于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增菌培养(GB标准)incubationmedia改良磷酸盐缓冲液PSB250用于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增菌培养(GB标准)
四号琼脂 250g 用于霍乱弧菌的选择性分离培养
马铃薯葡萄糖琼脂(含*)250用于霉菌和酵母菌的计数和分离培养。
乙基紫叠钠肉汤 250(g) incubation media 乙基紫叠钠肉汤 250(g)
SOC肉汤 SOC Broth 250克 用于基因工程菌大肠杆菌培养
ITC肉汤250用于分离培养耶尔森氏菌(ISO方法)incubationmediaITC肉汤250用于分离培养耶尔森氏菌(ISO方法)
No.4AgarBase

〖英文名称〗：Rhodizonic acid sodium salt；Rhodizonic acid disodium salt；Sodium dihydroxydiquinolyl；Sodium tetraoxyhydroquinone；Disodium rhodizonate；5,6-Dihydroxy-5-cyclohexene-1,2,3,4-tetrone disodium salt  
〖其他名称〗：玫棕酸钠；5,6-二羟基-5-环己烯-1,2,3,4-四酮二钠盐；环己烯二醇四酮二钠
〖CAS号〗：523-21-7 
C6Na2O6=214.04
〖级别〗：AR
对钡灵敏度试验：合格
水溶解试验：合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：紫色或棕黑色结晶，溶于水呈桔黄色，微溶于*溶液，不溶于醇，溶液不稳定，使用时须用新鲜配制。〖熔点〗>300℃
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)检定钡、锶、钪、〖铅〗、锡和〖硫酸盐〗，在钡及〖硫酸盐〗容量测定中作指示剂
〖保存〗：RT
5-硝基邻菲啰