Sephadex G50 介质10mL实验方法产品介绍：

Sephadex G50 介质10mL实验方法使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 

10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

PotatoDextroseAgar(Chloramphenicol)
孟加拉红(虎红)培养基 250(g) incubation media 孟加拉红(虎红)培养基 250(g)
超级肉汤 Super Broth 250克 BR
CIN-基础250用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌(GB标准)incubationmediaCIN-基础250用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌(GB标准)
CC琼脂添加剂 1ml*5支 每支添加于100mlCC琼脂中
BIGGY琼脂250g用于念珠菌的分离培养和计数
孟加拉红(虎红)培养基 1000(g) incubation media 孟加拉红(虎红)培养基 1000(g)
超级琼脂 Super Agar 250克 BR
消毒灭菌效果评价incubationmedia消毒灭菌效果评价
CCAgarSupplement
BIGGYAgar
KF链球菌琼脂 100(g) incubation media KF链球菌琼脂 100(g)
TYGPN培养基 TYGPN Medium 250克 BR
营养肉汤(NB)250一般细菌培养,转种,复壮,增菌等.也可用于消毒效果测定incubationmedia营养肉汤(NB)250一般细菌培养,转种,复壮,增菌等.也可用于消毒效果测定
纤维二糖-*(CC)琼脂 250g 用于创伤弧菌分离培养基
0-玉米琼脂培养基250g用于白色念珠菌产芽管试验。
KF链球菌琼脂 100(g) incubation media KF链球菌琼脂 100(g)
印度墨水 Indian ink 100毫升 炭疽杆菌检测用配套试剂
营养琼脂(NA)250细菌计数(GB标准),不含糖,可作血琼脂基础,传代用.也可用于消毒效果测定incubationmedia营养琼脂(NA)250细菌计数(GB标准),不含糖,可作血琼脂基础,传代用.也可用于消毒效果测定
Cellobiose-polymyxinEAgar
en80-CornMeatAgarMediun
BCYE琼脂基础 100(g) incubation media BCYE琼脂基础 100(g)
碘附 Iodophor 500克 炭疽杆菌检测用配套试剂
普通肉汤培养基250用于*的增菌培养(SN、GB标准)，也可用于消毒效果测定incubationmedia普通肉汤培养基250用于*的增菌培养(SN、GB标准)，也可用于消毒效果测定
*双水解酶试验用培养基(AD) 5g 生化培养基，用于弧菌的*试验
SDAY培养基250g用于真菌的分离培养
GVPC琼脂基础 100(g) incubation media GVPC琼脂基础 100(g)
Campy-Cefex添加剂 Campy-Cefex Supplement 2毫升×10支 添加于200ml CAMPY-CEFEX琼脂基础中
一次性卫生用品检验incubationmedia一次性卫生用品检验
AagininedehydrolaseMedium
SDAYMedium
GVPC添加物 5支/盒 incubation media GVPC添加物 5支/盒
多项目尿液化学分析控制品 多项目尿液化学分析控制品 10毫升×6支
0.5%*250用于环氧乙烷消毒和电离辐射消毒过程监测指示菌(枯草杆菌色变种芽孢及短小杆菌芽孢)的培养(GB标准)incubationmedia0.5%*250用于环氧乙烷消毒和电离辐射消毒过程监测指示菌(枯草杆菌色变种芽孢及短小杆菌芽孢)的培养(GB标准)
嗜盐性试验用胰胨水 250g 用于弧菌的嗜盐试验
麦芽浸膏琼脂200g用于霉菌和酵母菌的分离培养和计数
胰蛋白胨大豆琼脂(TSA) 250(g) incubation media 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA) 250(g)
氰化高铁血红蛋白参比液(100g/L) Cyanomethemoglobin reference solution 10毫升×8支
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基250用于压力蒸气消毒过程监测指示菌(嗜热脂肪杆菌芽孢)的培养及消毒效果测定incubationmedia溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基250用于压力蒸气消毒过程监测指示菌(嗜热脂肪杆菌芽孢)的培养及消毒效果测定
Halophilicexperimentalmedium
MaltExtractAgar
改良平板计数琼脂(MPCA) 250(g) incubation media 改良平板计数琼脂(MPCA) 250(g)
氰化高铁血红蛋白参比液(150g/L) Cyanomethemoglobin reference solution 10毫升×8支
液体沙氏培养基250用于真菌、酵母菌增菌incubationmedia液体沙氏培养基250用于真菌、酵母菌增菌
副溶血性弧菌成套生化鉴定管(HRGB) 9种*2套/盒*5盒 用于副溶血性弧菌生化鉴定试验
皮肤癣菌鉴别琼脂(DTM)250g用于皮肤癣菌鉴别培养
Honda氏产毒肉汤基础 250(g) incubation media Honda氏产毒肉汤基础 250(g)
氰化高铁血红蛋白参比液(4种×2套) Cyanomethemoglobin reference solution 10毫升×8支
沙氏琼脂培养基250用于卫生用品的真菌检测incubationmedia沙氏琼脂培养基250用于卫生用品的真菌检测
革兰氏染色液 5ml*8 用于细菌的革兰氏染色试验

〖英文名称〗：5-Nitro-1，10-phenanthroline；5-Nitro-1,10-phenanthroline 
〖其他名称〗：5-硝基-1,10-菲啰啉；5-硝基-1,10-菲咯啉；5-硝基-1,10-邻二氮杂菲；5-硝基邻二氮杂菲；5-硝基-1,10-菲咯啉；5-硝基-1,10-菲罗啉；5-硝基-1,10-邻菲罗啉
〖CAS号〗：4199-88-6
C12H7N3O2?xH2O= 225.20 (anhydrous basis)
〖级别〗：AR
〖含量〗：≥98.0%
〖熔点〗：200～203℃
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：黄色或橙色结晶粉末
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
邻苯二酚紫
≥70%