Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL实验方法磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL实验方法使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL实验方法产品介绍：

Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL实验方法磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

*麦芽提取物琼脂培养基250g用于真菌的分离培养
TPY琼脂培养基 250(g) incubation media TPY琼脂培养基 250(g)
DME培养基 DMEM 10升 高糖，含丙酮酸钠和*
牛津琼脂(OXA)基础250用于单增李氏菌的选择性分离incubationmedia牛津琼脂(OXA)基础250用于单增李氏菌的选择性分离
菌种芽孢培养基 250g 用于嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢培养
察氏液体培养基250g用于测定真菌孢子发芽率
嗜冷菌计数琼脂 250(g) incubation media 嗜冷菌计数琼脂 250(g)
M9肉汤 M9 Broth 250克 BR
*2mg/支*5添于HB4incubationmedia*2mg/支*5添于HB4171中
BacillusBacteriaMedium
无机盐培养基250g用于纺织品防霉性能测试
缓冲蛋白胨水(BPW) 250(g) incubation media 缓冲蛋白胨水(BPW) 250(g)
M9CA肉汤 M9CA Broth 250克 BR
溴甲酚紫葡萄糖肉汤250用于低酸性罐头食品商业无菌检验incubationmedia溴甲酚紫葡萄糖肉汤250用于低酸性罐头食品商业无菌检验
细菌保存培养基 250g 用于嗜热脂肪芽孢杆菌菌种保存
InorganicSaltMedium
缓冲蛋白胨水(BPW) 1000(g) incubation media 缓冲蛋白胨水(BPW) 1000(g)
M63肉汤 M63 Broth 250克 BR
酸性肉汤250用于酸性罐头食品商业无菌检验incubationmedia酸性肉汤250用于酸性罐头食品商业无菌检验
BacterialStorageMedium
马铃薯液体培养基(含*)250g用于霉菌和酵母菌增菌培养
胆硫乳琼脂(DHL) 250(g) incubation media 胆硫乳琼脂(DHL) 250(g)
F-12营养混合物 F-12 Nutrient Mixture 10升 含L-*，不含NaHCO3
麦芽浸膏汤200用于酸性罐头食品商业无菌检验incubationmedia麦芽浸膏汤200用于酸性罐头食品商业无菌检验
肝肉琼脂培养基 250g 用于亚盐还原厌氧孢子的计数
Potatoliquidmedium
胆硫乳琼脂(DHL) 1000(g) incubation media 胆硫乳琼脂(DHL) 1000(g)
DMEM/F12培养基 F-12(DMEM) 10升 BR
锰盐营养琼脂250用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验incubationmedia锰盐营养琼脂250用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验
溴甲酚紫葡萄糖琼脂 250g 用于嗜热需氧芽孢杆菌计数
改良察氏液体培养基250g用于霉菌的增菌培养
三糖铁琼脂(TSI) 250(g) incubation media 三糖铁琼脂(TSI) 250(g)
M199培养基 M199 Medium 10升 细胞培养用
疱肉培养基基础250加入牛肉粒，用于肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验incubationmedia疱肉培养基基础250加入牛肉粒，用于肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验
BromcresolPurpleDextroseAgar

Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL实验方法C12H10NNaO3S=271.27
〖级别〗：IND 
对硝酸盐灵敏度：合格
对氧化剂灵敏度：合格
水中溶解试验：合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：白色或浅黄色结晶性粉末。对湿敏感。溶于水和热乙醇。zui大吸收波长290～295nm(水中)。有刺激性
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)氧化还原指示剂
〖保存〗：RT，避光
滂胺天蓝
〖英文名称〗：Pontamine sky blue 6BX；Direct blueⅠ；Chicago sky blue 6B；Chicago blue 6B；Bright greenish blue；C.I. 24410
〖其他名称〗：芝加哥天蓝6B；直接湖蓝6B；直接蓝1；联苯胺蓝FB；胺天蓝
〖CAS号〗：2610-05-1 
C34H24N6Na4O16S4=992.80
〖级别〗：chroma
aniline)