*标记 dUTP 溶液50μL图片磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

*标记 dUTP 溶液50μL图片使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
*标记 dUTP 溶液50μL图片产品介绍：

*标记 dUTP 溶液50μL图片磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

沙氏葡萄糖琼脂培养基(含*)250g用于真菌的分离培养
赖氨酸脱羧酶培养基 5(g) incubation media 赖氨酸脱羧酶培养基 5(g)
卫矛醇半固体发酵管 卫矛醇半固体发酵管 20支 BR
LPM琼脂250用于单增李氏菌选择性分离(加入七叶苷和柠檬酸铁铵)(FDA标准)incubationmediaLPM琼脂250用于单增李氏菌选择性分离(加入七叶苷和柠檬酸铁铵)(FDA标准)
TTCAgarBase
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)250g用于霉菌，酵母菌计数(GB/SN标准)
尿素琼脂基础 250(g) incubation media 尿素琼脂基础 250(g)
V-P半固体琼脂发酵管 V-P半固体琼脂发酵管 20支 BR
Half–Fraser培养基250用于李氏菌的增菌培养(MERCK标准)incubationmediaHalf–Fraser培养基250用于李氏菌的增菌培养(MERCK标准)
*培养基 250g 用于弯曲杆菌*耐受性试验(GB标准)
PotatoDextroseAgar
V-P半固体琼脂 250(g) incubation media V-P半固体琼脂 250(g)
3% NaC1V-P半固体发酵管 3% NaC1V-P半固体发酵管 20支 BR
Half–Fraser添加剂5ml*2添加到HB4用于李氏菌的选择性增菌培养incubationmediaHalf–Fraser添加剂5ml*2添加到HB4用于李氏菌的选择性增菌培养
GlycineMedium
赖酸培养基(LYS)250g用于野生酿酒酵母的分离
吲哚培养基(又名*肉汤) 10(g) incubation media 吲哚培养基(又名*肉汤) 10(g)
Korser氏肉汤发酵管 Korser氏肉汤发酵管 20支 BR
改良缓冲蛋白胨水(MBP)250用于单增李氏菌前增菌培养incubationmedia改良缓冲蛋白胨水(MBP)250用于单增李氏菌前增菌培养
快速硫化氢试验琼脂 250g 用于弯曲杆菌的硫化氢试验(GB标准)
马铃薯葡萄糖琼脂(USP)平板9cm*霉菌，酵母菌计数(GB/SN标准)
钠培养基 10(g) incubation media 钠培养基 10(g)
丙二酸盐发酵管 丙二酸盐发酵管 20支 BR
EB增菌液250用于单增李氏菌选择性增菌培养(SN标准)incubationmediaEB增菌液250用于单增李氏菌选择性增菌培养(SN标准)
H2STestMediumAgar

*标记 dUTP 溶液50μL图片生物染色实验：合格
PH：9.4～14.0
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：深蓝色粉末。易溶于水呈蓝色,不溶于乙醇。在浓硫酸中呈红棕色,当稀释后呈蓝紫色。zui大吸收波长607nm。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)动物组织学的复染剂。原生动物活体染色、细菌染色、神经细胞染色
〖保存〗：RT
7-氨基-4-甲基香豆素
〖英文名称〗：AMC；7-amino-4-methylcoumarin；Coumarin 120；7-Amino-4-methyl-2H-chromen-2-one；4-Methyl-7-aminocoumarin 
〖其他名称〗：香豆素120 
〖CAS号〗：26093-31-2 
C10H9NO2=175.18
〖级别〗：试剂级
〖含量〗：≥98.0%
〖熔点〗：224～230℃
nebis(N,N-d