填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次价格使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次价格产品介绍：

磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

麦芽汁培养基250g用于霉菌和酵母菌增菌培养
乳糖肉汤(LB) 250(g) incubation media 乳糖肉汤(LB) 250(g)
葡萄糖铵发酵管 葡萄糖铵发酵管 20支 BR
SCDLP液体培养基250用于化妆品样品制备，前增菌培养(GB标准)incubationmediaSCDLP液体培养基250用于化妆品样品制备，前增菌培养(GB标准)
CCDASupplement
MaltExtractMedium
赖氨酸铁琼脂(LIA) 250(g) incubation media 赖氨酸铁琼脂(LIA) 250(g)
葡萄糖发酵管 葡萄糖发酵管 20支 BR
*吐温80营养琼脂250用于化妆品细菌总数测定(GB标准)incubationmedia*吐温80营养琼脂250用于化妆品细菌总数测定(GB标准)
Campy-Cefex琼脂基础 250g 用于弯曲杆菌分离培养(FDA方法)
YPD液体培养基250g用于酵母菌的增菌培养
EF-18琼脂 250(g) incubation media EF-18琼脂 250(g)
酚红葡萄糖肉汤发酵管 酚红葡萄糖肉汤发酵管 20支 BR
乙酰胺琼脂250用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准)incubationmedia乙酰胺琼脂250用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准)
Campy-CefexAgarBase
YPDBroth
酚红煌绿琼脂 250(g) incubation media 酚红煌绿琼脂 250(g)
麦芽糖发酵管 麦芽糖发酵管 20支 BR
十六烷*基*琼脂250用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准)incubationmedia十六烷*基*琼脂250用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准)
Campy-Cefex添加剂 2ml*5 每支添加于200ml Campy-Cefex 琼脂基础中
酵母浸出物葡萄糖*琼脂培养基250g用于乳和乳制品中酵母菌和霉菌的计数
水琼脂培养基 250(g) incubation media 水琼脂培养基 250(g)
乳糖发酵管 乳糖发酵管 20支 BR
*发酵培养基250生化试验培养基，用于细菌(如*)*发酵试验(GB标准)incubationmedia*发酵培养基250生化试验培养基，用于细菌(如*)*发酵试验(GB标准)
Campy-CefexSupplement

〖级别〗：BS
λmax：503～507nm(H2O)
λmax.2：530～534nm(H2O) 
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：红色粉末，溶于水为大红色溶液，微溶于酒精和溶纤素，不溶于其他有机溶剂。遇浓硫酸呈蓝光红色，将其稀释后呈较黄的红色；遇浓硝酸呈桔红色溶液，后转橙色；遇浓盐酸生成红色沉淀，稀释后即溶解。其水溶液加浓盐酸呈红色；加氢氧液呈桔棕色。染色时遇铜离子使色泽带蓝光而暗；遇〖铁〗离子色泽带蓝光而浅。匀染性好。Colour Index Number 18050 
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)染色剂
〖保存〗：RT
赤藓红
〖英文名称〗：Tetraiodofluorescein sodium salt；Erythrosin； Sodium tetraiodofluorescein；Iodeosine；Erythrosine BS； Pyrosine B；Dianthine B；Erythrosin B
〖其他名称〗：藻红；藻红B；酸性地衣红；2′,4′,5′,7′-四碘荧光素二钠；四碘荧光素二钠；藻红B 钠盐；赤藓红B；润滑剂X-1；N,N'-亚乙基双硬脂酰胺；螺异苯并呋喃-1(3H),9’-[9H]占吨-3-酮-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘代二钠盐；四碘荧光素B；酸性红51 
〖CAS号〗：16423-68-0或568-63-8
malachite G