填入法 DNA 末端标记试剂盒 B5次图片磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

填入法 DNA 末端标记试剂盒 B5次图片使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
产品介绍：

磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

YeastExtractGlucoseOxytetracyclineAgar
半固体营养琼脂 250(g) incubation media 半固体营养琼脂 250(g)
1% NaC1乳糖发酵管 1% NaC1乳糖发酵管 20支 BR
明胶培养基基础250生化试验培养基，用于细菌明胶液化试验(GB标准)incubationmedia明胶培养基基础250生化试验培养基，用于细菌明胶液化试验(GB标准)
Preston肉汤基础 250g 用于空肠弯曲杆菌的选择性增菌
马铃薯葡萄糖半固体琼脂250g用于椰毒假单胞酵米面亚种的产毒培养
RVS肉汤 250(g) incubation media RVS肉汤 250(g)
3% NaC1乳糖发酵管 3% NaC1乳糖发酵管 20支 BR
绿脓菌素测定培养基(PDP)250用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准)incubationmedia绿脓菌素测定培养基(PDP)250用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准)
PrestonBrothBase
PotatoDextroseSemisolidAgar
MKTTn肉汤基础 250(g) incubation media MKTTn肉汤基础 250(g)
3.5% NaC1乳糖发酵管 3.5% NaC1乳糖发酵管 20支 BR
乳糖胆盐培养基250用于化妆品中粪大肠菌的测定(GB标准)incubationmedia乳糖胆盐培养基250用于化妆品中粪大肠菌的测定(GB标准)
改良CCD琼脂基础(mCCD) 250g 用于弯曲杆菌的分离培养(GB标准)
沙氏葡萄糖琼脂(USP)250g用于真菌的分离培养
M肉汤 250(g) incubation media M肉汤 250(g)
5%乳糖发酵管 5%乳糖发酵管 20支 BR
TTC*-吐温80-营养琼脂250用于化妆品中细菌总数测定(GB标准)incubationmediaTTC*-吐温80-营养琼脂250用于化妆品中细菌总数测定(GB标准)
CCDABase
SabouraudDextroseAgarMedium
煌绿肉汤增菌液基础 250(g) incubation media 煌绿肉汤增菌液基础 250(g)
1% NaC1阿拉伯糖发酵管 1% NaC1阿拉伯糖发酵管 20支 BR
HC琼脂基础250用于化妆品中霉菌总数测定(Acumedia方法)incubationmediaHC琼脂基础250用于化妆品中霉菌总数测定(Acumedia方法)
Bolton肉汤 250g 用于空肠弯曲菌的增菌(GB标准)
酪蛋白葡萄糖琼脂250g用于霉菌、酵母菌等的分离培养
Rustigian氏尿素培养基基础 250(g) incubation media Rustigian氏尿素培养基基础 250(g)
3% NaC1阿拉伯糖发酵管 3% NaC1阿拉伯糖发酵管 20支 BR
改良LETHEEN琼脂基础250用于化妆品中微生物检测(Acumedia方法)incubationmedia改良LETHEEN琼脂基础250用于化妆品中微生物检测(Acumedia方法)
BoltomBroth
SabouraudDextroseAgar
克氏枸橼酸盐培养基 250(g) incubation media 克氏枸橼酸盐培养基 250(g)
3.5% NaC1阿拉伯糖发酵管 3.5% NaC1阿拉伯糖发酵管 20支 BR
液体硫乙醇酸盐培养基(不含琼脂)250用于混浊制品需氧菌无菌试验(GB标准)incubationmedia液体硫乙醇酸盐培养基(不含琼脂)250用于混浊制品需氧菌无菌试验(GB标准)
Mueller-Hinton琼脂(MHA) 250g 用于弯曲杆菌的药物敏感性试验
沙氏葡萄糖琼脂(含*)250g用于霉菌和酵母菌的分离培养
MIO培养基 100(g) incubation media MIO培养基 100(g)
1% NaC1蔗糖发酵管 1% NaC1蔗糖发酵管 20支 BR
YPD琼脂250用于测定酵母菌总数(GB标准)incubationmediaYPD琼脂250用于测定酵母菌总数(GB标准)
Mueller-HintonAgar
Sabouraud-glucoseAgarwithChloramphenicol
煌绿磺胺琼脂(BGS琼脂) 250(g) incubation media 煌绿磺胺琼脂(BGS琼脂) 250(g)
3% NaC1蔗糖发酵管 3% NaC1蔗糖发酵管 20支 BR
抗生素检定培养基H)250用于*，，*，等效价测定incubationmedia抗生素检定培养基H)250用于*，，*，等效价测定
茚三酮溶液 5ml*2 用于空肠弯曲菌的检测。

C20H6I4Na2O5=879.88
〖级别〗：IND
〖含量〗（干品计）：≥80.0%
灵敏度试验：合格 
水溶解试验：合格
〖干燥失重〗：≤8.0%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：棕色粉末。溶于水溶液呈樱红色，溶于乙醇。加盐 酸于水液中析出黄棕色沉淀，加氢氧生成红色沉淀，但能溶于过量试剂中。zui大吸收波长(水中)524nm、(95％乙醇中) 531nm。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)沉淀滴定的吸附指示 剂。酸碱滴定荧光指示剂，pH大于2.5无荧光，pH不小于4.0呈浅绿色荧光。光度测定试剂。生物染色剂
〖保存〗：RT，避光
隐色结晶紫
〖英文名称〗：LCV；Leucocrystal Violet； 4,4',4''-Methylidynetris(N,N-dimethylaniline)；Leuco Crystal Violet
〖其他名称〗：隐性结晶紫；无色结晶紫；退色结晶紫；三(对二甲氨基苯基)甲烷
称〗：Leuco