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产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
几丁质酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/48样 | FS-01S63631 |
商品介绍:
测定意义
几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁中。而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点。
测定原理:
几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,进一步与DNS试剂反应产生棕红色化合物,在540nm处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。
自备实验用品及仪器
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(土壤样品专用)和蒸馏水。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
下列是公司正在热销的产品:
兔脑钠/脑钠肽(BNP)联免疫试剂盒大肠埃希氏Rb (4H1) Mouse mAb
兔Pdgfa相关蛋白(PDAP1)联免疫试剂盒慢生根瘤Rb (4H1) Mouse mAb
兔肾(REN)联免疫试剂盒苏云金芽孢杆库尔斯塔克亚种MARK3 Antibody
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兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)联免疫试剂盒豇豆慢生根瘤Phospho-GSK-3α (Ser21) (36E9) Rabbit mAb
兔丛生蛋白(CLU)联免疫试剂盒罗伦隐球酵母罗伦变种Phospho-GSK-3α (Ser21) (36E9) Rabbit mAb
兔粒趋化蛋白2(GCP-2)联免疫试剂盒山茶Phospho-GSK-3α (Ser21) (36E9) Rabbit mAb
兔中间α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)联免疫试剂盒溜曲霉Src Family Antibody Sampler Kit
兔C-肽(C-P)联免疫试剂盒果生链核盘ESET (D4M8R) XP® Rabbit mAb
几丁质酶检测试剂盒微量法亚磷酯 98%连翘 分析标准品,>96.00% (HPLCInsulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰岛受体-β(抗原)
亚磷酯 CP,95.0% 藤黄 97% (HPLC)IRS-1 胰岛受体底物-1(抗原)
2-基-4-甲基嘧 98%连翘脂 分析标准品,>98%AQP3(aquaporin 3) 水通道蛋白-3抗原
2,4-二氯嘧 98%原人参二 分析标准品,≥98%IRS-2 胰岛受体底物-2(抗原)
2,4-二氯-5-甲基嘧 98%番泻叶苷A 分析标准品,≥96%AQP1(Aquaporin1) 水通道蛋白-1抗原
2-羟基嘧盐盐 98%番泻苷B 分析标准品,≥97%(HPLC)IRS-3 胰岛受体底物-3(抗原)
2,4,6- 95%菝葜皂苷元 分析标准品,≥98%IRS-4 胰岛受体底物-4(抗原)
阿拉伯树胶 医药级知母皂苷A-Ⅲ 分析标准品,≥97%AQP5(aquaporin Protein-5) 水通道蛋白-5抗原