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商品介绍:
测定意义
AsA作为植物细胞一个重要生理指标,其AsA 的含量、氧化还原状态(AsA/DHA 比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。DHA是AsA的可逆的氧化型,在生物体内,与抗坏血酸共同组成氧化还原系统,具有电子受体的作用。
测定原理:
DTT还原DHA生成AsA,通过测定体系中AsA的生成速率,即可计算出DHA含量。
自备仪器和用品:
低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
DHA氧化型/脱氢抗坏血酸检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63278 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
兔血管生成4(ANGPT4)试剂盒 Anti-GNAQ Antibody锌指转录因子Slug抗体
兔锚蛋白B(Ank-B)试剂盒 Anti-GNB1 Antibody(PB1121)磷化脑质膜单转运蛋白PMAT抗体
兔红藻离子型谷受体2(GRIK2)试剂盒 Anti-Glypican 5/GPC5 Antibody突触蛋白6抗体
兔血红蛋白(HB)试剂盒Anti-Glutaminase/GLS Antibody脑质膜单转运蛋白PMAT抗体
兔心肌营养1(CT-1)试剂盒 Anti-GNG11 Antibody超氧化物歧化4抗体
兔SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)试剂盒Anti-GNG2 Antibody可溶性载质转运蛋白2B1抗体
兔硫皮肤(DS)试剂盒 Anti-GNG4 Antibody磷化外纺锤体样蛋白1抗体
兔肝脏胶原凝集1(CLL1)试剂盒 Anti-GNS Antibody小跨膜糖化蛋白抗体
兔蛋白酪磷受体B(PTPRB)试剂盒Anti-Golm1/GOLPH2 Antibody钠通道蛋白10α抗体
兔基质衍生因子2样蛋白1(SDF2L1)试剂盒Anti-GOLGA2 Antibody表面蛋白Sp17抗体
兔球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)试剂盒 Anti-GORAB(SCYL1BP1) Antibody新朊蛋白抗体(C端)
兔补体1q(C1q)试剂盒 Anti-GP2 Antibody上皮钠通道β抗体
兔微纤丝相关蛋白4(MFAP4)试剂盒 Anti-GPC3 Antibody磷化上皮钠通道β2抗体
兔癌胚抗原(CEA)试剂盒 Anti-GOLPH3 Antibody磷化上皮钠通道β2抗体
兔甲酰甲硫(fMet)试剂盒 Anti-GPCR TGR5/GPBAR1 AntibodyS100B蛋白抗体
DHA氧化型/脱氢抗坏血酸检测试剂盒微量法仲丁基 99%丰度:99atom%;化学纯度:≥98.5%GDNF 小鼠神经胶质系衍化神经营养因子
丁酮 99%丰度:10atom%;化学纯度:≥98.5% BFGF 小鼠性成纤维因子
4-溴基 97%丰度:99atom%;化学纯度:≥98.5%HGF 小鼠肝生长因子
4-溴-4',4''-二甲基三 95%丰度:10atom%;化学纯度:≥98.5%NE(Humen) 小鼠去甲肾上腺
2-叔丁基蒽醌 98%丰度:99atom%;化学纯度:≥98.5%DA 小鼠多巴
N,N'-双(3-基)乙二 97%丰度:10atom%;化学纯度:≥98.5%NT-3 小鼠神经营养-3
己二二异辛酯 99%丰度:99atom%;化学纯度:≥98.5%NT-4 小鼠神经营养-4
磺 98%丰度:10atom%;化学纯度:≥98.5%NAP 小鼠中性粒活化肽