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商品介绍:
测定意义
AAT是一个多功能蛋白大家族,主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应,在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。
测定原理:
AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇,释放的CoA还原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,测定412 nm吸光度增加速率可计算AAT活性。
自备仪器和用品:
研钵、冰、台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
AAT酰基转移酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63525 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
紫色直丝链霉Sheep CG (Chorionic Gonadotropin) ELISA Kit
秀珍菇Sheep IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit
节杆属Sheep AP (Allopregnanolone) ELISA Kit
香菇Sheep AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit
中国汉纳酵母Sheep COL3 (Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit
黑曲霉Sheep ApoA5 (Apolipoprotein A5) ELISA Kit
干酪乳杆Sheep ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit
卤水糖螺Sheep Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit
汉逊德巴利酵母Sheep PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit
钟器腐霉Sheep PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit
柑橘青霉Sheep PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit
北京芽孢杆Sheep NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit
黑根霉Sheep IL-5 (Interleukin 5) ELISA Kit
欧文氏属GHRL (Ghrelin) ELISA Kit
固氮GHRL (Ghrelin/Obestatin Preprohormone) ELISA Kit
AAT酰基转移酶检测试剂盒微量法乙 for HPLC, >99.0%(GC),含2%乙作稳定剂气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):200m2/g;氯化物:0.01Anti-IFN- Beta/FITC 荧光标记抗人干扰-β抗IgG
二甲基黄 indicator气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):300m2/g;粒径:7-40nAnti-IFN- Gamma/FITC 荧光标记干扰-γ抗体IgG
砷试剂 AR,99.0%气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):170m2/g;粒径:7-40nAnti-IFN- Gamma/FITC(Interferon Gamma) 荧光标记抗大、小鼠IFN-γ抗IgG
1,2-二氯乙烷 standard for GC,>99.9%(GC)气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):120m2/g;粒径:7-40nAnti-IFNGR2/FITC 荧光标记干扰-gamma受体2抗体IgG
1,3-二基-4-(5-溴-2-吡偶氮) AR疏水气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):230m2/g;;粒径:7-40nAnti-IFN- Gamma/HRP 辣根过氧化物标记鼠抗人干扰-γ/IFN-gamma单克隆抗体IgG
2-(3,5-二溴-2-吡偶氮)-5-二乙基 AR气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):100m2/g;粒径:7-40nAnti-IFNGR1/CD119/FITC 荧光标记干扰-gamma受体抗体IgG
二乙基乙基纤维-1 TLC二氧化硅 99.5%,30±5nmAnti-IGC/FITC 荧光标记兔抗非洲爪蟾IGC抗体IgG
二甲基黄 分析标准品,≥98.0% (HPLC)二氧化硅 99.5%,15±5nmAnti-IGF-I/FITC 荧光标记标记胰岛样生长因子-I抗体IgG