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上海市所在地
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
羟自由基清除能力检测试剂盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | FS-01S63329 |
商品介绍:
测定意义
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。
测定原理:
H2O2/ Fe2+ 通过Fenton反应产生羟自由基,水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质2,3-二羟基苯甲酸,在510nm处有最大吸收峰,加入具有清除能力的物质后,有色物质便会减少,从而可以根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。
自备实验用品:
恒温水浴锅、酶标仪、96孔板和蒸馏水。
产品内容:
公司产品仅用于科研酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
下列是公司正在热销的产品:
核呼吸因子2Nuclear Respiratory Factor 2
白细胞介13Interleukin 13
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor
性结合球蛋白sex hormone-binding globulin
蛋白激RProtein kinase R
血小板反应蛋白;凝血敏感蛋白1thrombospondin 1
µ型受体Mu-type opioid receptor
类缺陷病2Immunodeficiency virus
因子Iacoagulation factorIa
拓扑异构10Topoisomerase 10
金球菌肠DStaphylococcal EnterotoxinD
活性氧簇reactive oxygen species
亚硝还原Nitrite reductase
间隙连接蛋白43Connexin 43
二酰基甘油酰基转移2diacylglycerol acyltransferase2
羟自由基清除能力检测试剂盒可见分光光度法正丁 AR,99%六氯标准溶液 10.0ng/μL,基体:异辛烷sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit 人血管内皮钙粘着蛋白复合体
正丁 CP,98%氯化铟 99.9% metals basisAlpha-SMA(Human Alpha-Smooth muscle actin) ELISA Kit 人α平滑肌肌动蛋白
正丁 99.5%硫铟 无水,99.99% metals basisAlpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit 人α横纹肌肌动蛋白
邻甲酚 99%氢氧化铟 99.99% metals basisSMM(Human smooth muscle Myosin) ELISA Kit 人平滑肌肌球蛋白
异丁 98%八氟萘溶液 100pg/μL,基体:异辛烷c(Human cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 人心肌特异性肌钙蛋白T
2-硝基烷 96%纳米氮化铝 99.9% metals basis,50nmMHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit 人肌球蛋白重链
1-硝基烷 99%碳化 99%,50nmHSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit 人热休克蛋白27
烷 99%纳米碳化硅 99.9% metals basis,40nmANG(Human angiostatin) ELISA Kit 人血管抑/血管稳定蛋白
注意事项:
1、操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。