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miRNA PAGE 胶回收试剂盒40 次实验方法产品介绍:
miRNA PAGE 胶回收试剂盒40 次实验方法使用方法:
一、准备工作 1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿(详见该产品的使用手册)。 2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍,得到 1X 电泳缓 冲液待用。 3. 配制 10%过硫酸铵溶液 精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中,按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,摇晃致溶, 立即使用。注意:放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶 1. 估计所需要的凝胶溶液的体积,一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液,配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶 需要 120 mL 凝胶溶液。 2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制:在装有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有 毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充 分摇晃混匀后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积,在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分 (此处以配制 100mL 浓度为 15%的凝胶为例):
4. 搅拌并加热到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷却到室温后,将三角瓶接上真空系统抽真空处理 10-15 分钟以充分去 除溶液中的氧气(氧气会降低聚合反应效率)。但如果实验条件有限,此 步也可以省略。
6. 边摇晃溶液变加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%过硫酸铵。注意:即 使选择其他工作浓度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%过硫酸铵的用 量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化,TEMED 和 10%过硫酸铵的用量也要按比例改变。
7. 再充分摇晃约 30 秒后迅速灌胶,然后插入样品梳。
8. 室温放置 30-60 分钟使胶凝固。
9. 将凝胶板放置在电泳装置上后,在上下层分别加入适当量的 1X 电泳缓冲 液。如果不马上使用,需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
10. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液,充分将每个加样空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。
产品及特点:
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是单独 配制各种溶液十分繁琐,为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式,含有电泳所需要的所有试剂,即开即用,十分方便,免去了 实验人员称取有毒物品。
2. 灵活,可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE,以便对长度各异 的 RNA 进行电泳。
3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自 显影等。
4. 使用新型缓冲液,可以防止甘油的干扰。
〖英文名称〗:Sunset Yellow FCF;Food Yellow 3;C.I. 15985;FD&C Yellow No. 6;Disodium 6-hydroxy-5-[(4-sulphonatophenyl)azo]naphthalene-2-sulphonate
〖其他名称〗:日落黄FCF;1-对磺酸苯基偶氮-2-羟基萘-6-磺酸二钠盐;食用黄色6号;食品黄3;食用桔黄
〖CAS号〗:2783-94-0
C16H10N2Na2O7S2=452.37
〖级别〗:AR
〖含量〗:≥87.0%
干燥减量、〖氯化物〗及〖硫酸盐〗总量:≤13.0%
水中不溶物:≤0.2 %
〖砷〗:≤3ppm
〖铅〗:≤10ppm
汞:≤1ppm
镉:≤1ppm
〖鉴别〗方法:
1.本品0.1g溶于100ml水中,呈黄色澄清溶液。
2.本品微溶于乙醇,不溶于油脂,具有酸性染料的特性,能使动物纤维着色。
3.100ml含有0.001g本品的0.02mol/L乙酸铵溶液,其zui大吸收波长为482±2nm。
4.取本品水溶液做纸上层析,其主色点的Rf值应与标准样品相同。
纸上层析条件:
展开剂:正丁醇:无水乙醇:氨水(1%)=6:2:3
温度:20~25℃
沙氏葡萄糖琼脂(SDA)250g用于真菌的分离培养
阪崎肠杆菌显色培养基 200g/瓶 incubation media 阪崎肠杆菌显色培养基 200g/瓶
弧菌显色培养基选择性添加剂冻干试剂 10支 每支添加于100ml(CRM008)弧菌显色培养基中。
增菌肉汤培养基EEnrichmentbrothmediumE用于肠杆菌科细菌的增菌培养
MRS琼脂 250g 用于食品中乳酸菌的分离培养或计数。
*(USP)250g用于霉菌和酵母菌计数。
弧菌显色培养基(VA) 1000mL/瓶 incubation media 弧菌显色培养基(VA) 1000mL/瓶
葡萄糖肉汤 250g 用于细菌培养,特别是检测一次性使用卫生用品中溶血性链球菌(GB15979-2002)及检测肠杆菌产气。
琼脂培养基FAgarmediumF用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别
MRSAgar
大豆酪蛋白消化物培养基250g一种通用的微生物培养基,用于多种微生物的培养(USP标准)
*显色培养基 500mL/瓶 incubation media *显色培养基 500mL/瓶
匹克氏肉汤基础 100g 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。
肉汤培养基GBrothmediumG(MacConkeybroth)用于大肠杆菌、大肠菌的检测
LBS琼脂 250g 用于乳酸菌检测和分离培养
SoybeanCaseinDigestMedium
*显色培养基 1000mL/瓶 incubation media *显色培养基 1000mL/瓶
肉浸液肉汤 250g 用于*、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准)
琼脂培养基HAgarmediumH(MacConkeyagar)用于肠道致病菌的选择性分离培养。
LBSagar
PH7.0缓冲钠蛋白胨溶液250g用于药品中细菌的前增菌或样品制备
*显色培养基 5000mL/瓶 incubation media *显色培养基 5000mL/瓶
葡萄糖肉浸液肉汤 250g 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2...
肉汤培养基IBrothmedium用于沙门氏菌选择性增菌培养。
M17琼脂 250g 用于牛奶和乳制品中乳酸菌检测和分离培养
大豆酪蛋白消化物琼脂培养基250g用于药品中需氧菌总数测定
mEI琼脂(肠球菌显色培养基) 1000mL/瓶 incubation media mEI琼脂(肠球菌显色培养基) 1000mL/瓶
哥伦比亚琼脂培养基 250g 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201...
琼脂培养基JAgarmediumJ(Deoxycholatecitrateagar)用于沙门氏菌选择性分离培养
M17Agar
SoybeanCaseinDigestAgarMedium
ECC显色培养基A 1000 mL/瓶 incubation media ECC显色培养基A 1000 mL/瓶
*基础 250g 加入脱纤维羊血或兔血,制成*,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-...
琼脂培养基KAgarmediumK(Xylose,lysine,deoxycholateagar)用于沙门氏菌选择性分离培养
M17肉汤 250g 用于牛奶和乳制品中乳酸菌检测和分离培养
液体连四盐培养基250g用于沙门氏菌选择性增菌培养。
ECC显色培养基B 25000mL/瓶 incubation media ECC显色培养基B 25000mL/瓶
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 250g 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、*的非选择性增菌培养及蜡...
琼脂培养基LAgarmediumL用于沙门氏菌的选择性分离培养
M17Broth
FluidTetrathionateMedium
*显色培养基 500 mL/瓶 incubation media *显色培养基 500 mL/瓶
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 2x5支 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。
琼脂培养基MAgarmediumM(Triplesugar,ironagar)用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选。
乳酸杆菌选择性琼脂 250g 用于乳酸杆菌检测和分离培养
*盐琼脂(USP)250g用于*选择性分离培养
*显色培养基 1000 mL/瓶 incubation media *显色培养基 1000 mL/瓶
PALCAM琼脂冻干配套试剂 10支 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。
琼脂培养基NAgarmediumN(Cetrimideagar)用于绿脓假单胞菌的分离培养。
LactobacillusSelectiveAgar
溴化十六烷基*铵琼脂(USP)250g用于绿脓假单胞菌的分离培养
*显色培养基 5000 mL/瓶 incubation media *显色培养基 5000 mL/瓶
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 10支 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。
琼脂培养基OAgarmediumO(Baird-Parkeragar)用于*的分离培养。
APT琼脂 250g 用于乳酸菌分离培养
欧洲药典培养基(EP标准)
李斯特菌显色培养基 1000 mL/瓶 incubation media 李斯特菌显色培养基 1000 mL/瓶
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 10支 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。
培养基PMediumP(Reinforedmediumforclostridia)用于梭菌的增菌培养和计数。
APTAgar
琼脂培养基B250g一种通用的营养培养基,用于各种微生物的培养。
李斯特菌显色培养基 5000 mL/瓶 incubation media 李斯特菌显色培养基 5000 mL/瓶
EB增菌液冻干配套试剂 10支 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。
培养基QMediumQ(Columbiaagar)营养非常丰富,用于各种细菌的基础培养基。
BL琼脂培养基 250g 用于双岐杆菌分离培养(GB标准)
AgarmediumB(Caseinsoyabeandigestagar)
弧菌显色培养基 1000 mL/瓶 incubation media 弧菌显色培养基 1000 mL/瓶
Fraser肉汤增菌液(FB1,FB2)基础 250g 用于李斯特氏的选择性增菌培养(SN/T0184.1-2005,ISO标准)。
培养基RMediumR(Lactosemonohydratesulphitemedium)用于大肠菌选择性增菌
BLAgarMedium
素琼脂基础MYP 250g