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微量核酸沉淀剂10mL实验方法产品及特点:
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是单独 配制各种溶液十分繁琐,为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式,含有电泳所需要的所有试剂,即开即用,十分方便,免去了 实验人员称取有毒物品。
2. 灵活,可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE,以便对长度各异 的 RNA 进行电泳。
3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自 显影等。
4. 使用新型缓冲液,可以防止甘油的干扰。
微量核酸沉淀剂10mL实验方法产品介绍:
使用方法:
一、准备工作 1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿(详见该产品的使用手册)。 2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍,得到 1X 电泳缓 冲液待用。 3. 配制 10%过硫酸铵溶液 精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中,按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,摇晃致溶, 立即使用。注意:放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶 1. 估计所需要的凝胶溶液的体积,一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液,配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶 需要 120 mL 凝胶溶液。 2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制:在装有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有 毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充 分摇晃混匀后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积,在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分 (此处以配制 100mL 浓度为 15%的凝胶为例):
4. 搅拌并加热到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷却到室温后,将三角瓶接上真空系统抽真空处理 10-15 分钟以充分去 除溶液中的氧气(氧气会降低聚合反应效率)。但如果实验条件有限,此 步也可以省略。
6. 边摇晃溶液变加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%过硫酸铵。注意:即 使选择其他工作浓度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%过硫酸铵的用 量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化,TEMED 和 10%过硫酸铵的用量也要按比例改变。
7. 再充分摇晃约 30 秒后迅速灌胶,然后插入样品梳。
8. 室温放置 30-60 分钟使胶凝固。
9. 将凝胶板放置在电泳装置上后,在上下层分别加入适当量的 1X 电泳缓冲 液。如果不马上使用,需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
10. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液,充分将每个加样空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。
〖英文名称〗:Thiazole Orange;1-Methyl-4-[(3-methyl-2(3H)-benzothiazolylidene)methyl]quinolinium p-tosylate
〖CAS号〗:107091-89-4
C26H24N2O3S2=476.61
〖级别〗:BR
有效分光〖含量〗:~90%
消光系数Extinction Coefficient:≥65000 (波长Wavelength501-513nm)
消光系数Extinction Coefficient:≥10000 (波长Wavelength286-290nm)
消光系数Extinction Coefficient:≥28000 (波长Wavelength235-239nm)
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:橙色或红橙色粉末,〖熔点〗270℃
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
2-氨基吖啶酮
〖英文名称〗:AMAC;2-Aminoacridone;2-Ami0H-acridin-9-one
〖CAS号〗:27918-14-5
C13H10N2O=210.23
〖级别〗:BR
〖含量〗:≥98%(HPLC)
荧光性:λex 420 nm; λem 538 nm in 0.1 M Tris pH 8.0
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:粉末。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)适合荧光性研究
〖保存〗:RT
金黄三羧酸
〖英文名称〗:ATA;Aurintricarboxylic acid
〖其他名称〗:金精三羧酸
〖CAS号〗:4431-00-9
克氏琼脂250g用于铜绿假单胞菌的克氏试验
胰蛋白大豆琼脂 用于无菌试验和多种菌的计数和分离培养 500g incubation media 胰蛋白大豆琼脂 用于无菌试验和多种菌的计数和分离培养 500g
大豆根瘤菌 测定*12 支/瓶
TSA培养基平板(9cm)用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测
Egg-YolkSaltAgarBase
Kligler'sAgar
Tryptic Soy Agar (Soybean-Casein Digest Agar Medium) incubation media Tryptic Soy Agar (Soybean-Casein Digest Agar Medium)
大豆慢生根瘤菌 检测用菌 支/瓶
TSA
抗生素检定培养基2号(低PH)(05药典) 250g 用于四环素,*等效价测定
铁琼脂250g用于产硫化氢细菌计数
马铃薯葡萄糖琼脂 霉菌和酵母菌的培养及计数 500g incubation media 马铃薯葡萄糖琼脂 霉菌和酵母菌的培养及计数 500g
大丽花轮枝孢 快生型 支/瓶
RODAC接触皿(TSA)(6.5cm)用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测
AntibioticAgarNO.2
*琼脂培养基250g用于纺织品微真菌影响评价试验
Potato Dextrose Agar incubation media Potato Dextrose Agar
大霉 细菌肥料 支/瓶
RODAC
2010版中国药典培养基
CompleteAgarMedium
磷酸缓冲液pH7.2 缓冲液和溶液 500g incubation media 磷酸缓冲液pH7.2 缓冲液和溶液 500g
大球盖菇 棉花黄萎病菌。 支/瓶
平板计数琼脂平板(9cm)标准平板计数琼脂,含糖,用于细菌总数的测定
察氏琼脂 250g 用于青霉,曲霉鉴定及保存菌种用(GB标准)
L型细菌高渗盐*250g用于L型细菌增菌培养
Phosphate Buffer, pH 7.2 incubation media Phosphate Buffer, pH 7.2
大秃马勃 支/瓶
PlateCountAgar
CzapekDoxAgar
L-BacterialHypertonicSaltBroth
缓冲钠-蛋白胨溶液pH7.0 缓冲液和溶液 500mL*10 incubation media 缓冲钠-蛋白胨溶液pH7.0 缓冲液和溶液 500mL*10
戴尔根霉 食用。 支/瓶
营养琼脂平板(9cm)细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用
产毒培养基 250g 用于青霉,曲霉的产毒培养
葡萄糖酸盐20支绿脓杆