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微量 DNA 助沉剂0.1mL*使用方法:
一、准备工作 1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿(详见该产品的使用手册)。 2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍,得到 1X 电泳缓 冲液待用。 3. 配制 10%过硫酸铵溶液 精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中,按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,摇晃致溶, 立即使用。注意:放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶 1. 估计所需要的凝胶溶液的体积,一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液,配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶 需要 120 mL 凝胶溶液。 2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制:在装有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有 毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充 分摇晃混匀后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积,在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分 (此处以配制 100mL 浓度为 15%的凝胶为例):
4. 搅拌并加热到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷却到室温后,将三角瓶接上真空系统抽真空处理 10-15 分钟以充分去 除溶液中的氧气(氧气会降低聚合反应效率)。但如果实验条件有限,此 步也可以省略。
6. 边摇晃溶液变加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%过硫酸铵。注意:即 使选择其他工作浓度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%过硫酸铵的用 量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化,TEMED 和 10%过硫酸铵的用量也要按比例改变。
7. 再充分摇晃约 30 秒后迅速灌胶,然后插入样品梳。
8. 室温放置 30-60 分钟使胶凝固。
9. 将凝胶板放置在电泳装置上后,在上下层分别加入适当量的 1X 电泳缓冲 液。如果不马上使用,需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
10. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液,充分将每个加样空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。
微量 DNA 助沉剂0.1mL*产品及特点:
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是单独 配制各种溶液十分繁琐,为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式,含有电泳所需要的所有试剂,即开即用,十分方便,免去了 实验人员称取有毒物品。
2. 灵活,可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE,以便对长度各异 的 RNA 进行电泳。
3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自 显影等。
4. 使用新型缓冲液,可以防止甘油的干扰。
产品介绍:
C9H6O2=146.14
〖级别〗:BR
〖含量〗:≥97%
〖熔点〗:117~124℃
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:黄色粉末或结晶。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
4-苄基氨基-7-硝基苯并氧杂恶二唑
〖英文名称〗:BBD;7-Benzylamino-4-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazole;4-Benzylamino-7-nitrobenzofurazan
〖其他名称〗:4-苄氨基-7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑;4-苄基氨基-7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑
〖CAS号〗:18378-20-6
C13H10N4O3=270.25
〖级别〗:BR
〖含量〗:≥98%
〖熔点〗:206~209℃
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:棕色粉末
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)蛋白质荧光探针
解磷细菌培养基250g用于解磷细菌的分离培养
营养肉汤 非苛养要求微生物的普通培养 500g incubation media 营养肉汤 非苛养要求微生物的普通培养 500g
蛾微杆菌 支/瓶
Baird-Parker琼脂平板(9cm)用于*的选择性分离培养
YM11琼脂 250g 滤膜法用于霉菌,酵母菌的分离培养(NEOGEN)
Phosphate-solubilizingbacteriamedium
Nutrient Broth incubation media Nutrient Broth
恶臭醋酸杆菌混浊变种 酱油酵母 支/瓶
Baird-ParkerAgarBase
YM11Agar
固氮根瘤菌培养基250g用于固氮菌的分离培养
营养琼脂 培养多种微生物 500g incubation media 营养琼脂 培养多种微生物 500g
恶臭假单胞菌 支/瓶
孟加拉红培养基平板(9cm)用于食品中霉菌及酵母菌总数测定
OGY琼脂 250g 用于霉菌和酵母菌分离培养和计数
Nitrogen-fixingRhizobiummedium
Nutrient Agar incubation media Nutrient Agar
发根根瘤菌 除光学仪器外的防霉试验菌种。 支/瓶
RoseBengalMedium
OGYAgar
联合固氮菌培养基250g用于固氮菌的分离培养
麦芽浸出液琼脂 分离计数酵母和霉菌 500g incubation media 麦芽浸出液琼脂 分离计数酵母和霉菌 500g
发根土壤杆菌(发根植物单胞菌) 支/瓶
牛津琼脂(OXA)平板(9cm)用于单增李氏菌的选择性分离
WL营养琼脂 250g 用于啤酒和发酵产品中酵母菌和细菌的计数
Combinednitrogen-fixingbacteriamedium
Malt Extract Agar incubation media Malt Extract Agar
发光假蜜环菌 氧化乙醇产醋酸量高 支/瓶
OxfordAgarBase
WLNutrientAgar
固氮菌用阿须贝氏培养基250g用于固氮菌的分离培养
Fluid Lactose Medium incubation media Fluid Lactose Medium
发酵乳杆菌 质量控制菌株 支/瓶
PALCAM琼脂平板(9cm)用于单增李氏菌选择性分离
改良沙氏琼脂培养基 250g 用于真菌培养
Nitrogen-fixingbacteriawiththeASugai’smedium
Baird-Parker琼脂基础 与卵黄亚碲酸盐增菌液合用,用于*选择性培养 500g incubation media Baird-Parker琼脂基础 与卵黄亚碲酸盐增菌液合用,用于*选择性培养 500g
发酵纤维单胞菌 produces isoprene 支/瓶
PALCAMAgar
Sabouraud'sAgar,Modified
无机磷细菌培养基250g用于测定磷细菌肥料中磷细菌分解无机磷的效能
Baird-Parker Agar Base incubation media Baird-Parker Agar Base
发酵性酵母 支/瓶
MRS琼脂平板(9cm)用于食品中乳酸菌总数测定
沙氏BHI琼脂 250g 用于真菌检测
0010 琼脂粉 BR 250 g