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Southern Marker Oligo( * )20 次*使用方法:
一、准备工作 1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿(详见该产品的使用手册)。 2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍,得到 1X 电泳缓 冲液待用。 3. 配制 10%过硫酸铵溶液 精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中,按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,摇晃致溶, 立即使用。注意:放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶 1. 估计所需要的凝胶溶液的体积,一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液,配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶 需要 120 mL 凝胶溶液。 2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制:在装有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有 毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充 分摇晃混匀后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积,在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分 (此处以配制 100mL 浓度为 15%的凝胶为例):
4. 搅拌并加热到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷却到室温后,将三角瓶接上真空系统抽真空处理 10-15 分钟以充分去 除溶液中的氧气(氧气会降低聚合反应效率)。但如果实验条件有限,此 步也可以省略。
6. 边摇晃溶液变加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%过硫酸铵。注意:即 使选择其他工作浓度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%过硫酸铵的用 量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化,TEMED 和 10%过硫酸铵的用量也要按比例改变。
7. 再充分摇晃约 30 秒后迅速灌胶,然后插入样品梳。
8. 室温放置 30-60 分钟使胶凝固。
9. 将凝胶板放置在电泳装置上后,在上下层分别加入适当量的 1X 电泳缓冲 液。如果不马上使用,需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
10. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液,充分将每个加样空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。
Southern Marker Oligo( * )20 次*产品及特点:
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是单独 配制各种溶液十分繁琐,为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式,含有电泳所需要的所有试剂,即开即用,十分方便,免去了 实验人员称取有毒物品。
2. 灵活,可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE,以便对长度各异 的 RNA 进行电泳。
3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自 显影等。
4. 使用新型缓冲液,可以防止甘油的干扰。
Southern Marker Oligo( * )20 次*产品介绍:
〖铁〗盐:≤0.001%
〖硫酸盐〗:≤0.005%
钙盐:≤0.002%
〖〖砷〗盐〗:≤0.0002%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:无色或微黄色、微粘性澄清液体,无味或轻微特殊气味
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
柠檬酸〖锌〗
〖英文名称〗:Zinc citrate;Zinc chromate(VI)
〖其他名称〗:枸橼酸〖锌〗;〖锌〗铬黄;〖锌〗黄;2-羟基-1,2,3-丙烷*酸〖锌〗盐;柠檬酸三〖锌〗;2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸〖锌〗
〖CAS号〗:546-46-3
C12H10O14Zn3=574.37
〖级别〗:CP
Southern Marker Oligo( * )20 次*HelicobacterPyloriMedium
*(10mg/ml) incubation media *(10mg/ml)
汉逊德巴利酵母 土壤真菌,有较强的纤维分解能力,对多种真菌有拮抗作用,是良好的生防菌。 支/瓶
PlateCountAgar
赖氨酸培养基(LYS) 250g 用于野生酿酒酵母的分离
幽门螺杆菌培养基(液体)250g用于幽门螺杆菌选择性增菌培养。
Gentamicin *浓度:0.5-50ug/ml Gentamicin *浓度:0.5-50ug/ml
河流弧菌 支/瓶
营养琼脂平板(9cm)细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用
马铃薯葡萄糖琼脂(USP)平板 9cm*10 用于霉菌,酵母菌计数(GB/SN标准)
HelicobacterPyloriMedium
保存15-30° 15710-064 10ml 保存15-30° 15710-064 10ml
褐球固氮菌 *的含量测定,检测莫能菌素,品质控制,测试杀菌剂 支/瓶
NutrientAgar
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA) 250g 用于霉菌,酵母菌计数
M250g用于细菌培养。
*(50mg/ml) incubation media *(50mg/ml)
根霉 支/瓶
血平皿(9cm)用于一般细菌的分离、培养和溶血试验
PotatoDextroseAgar
Mium
Gentamicin *浓度:0.5-50ug/ml Gentamicin *浓度:0.5-50ug/ml
菇、烟色红菇 模式菌株 支/瓶
BloodAgarPlates
马铃薯琼脂培养基 250g 用于霉菌的鉴定培养
K氏培养基250g用于果汁或浓缩果汁中脂环芽孢杆菌
保存15-30° 15750-060 10ml 保存15-30° 15750-060 10ml
化链霉菌 糖蜜原料发酵柠檬酸。 支/瓶
哥伦比亚*(9cm)用于营养要求高细菌的分离、培养和溶血试验
PotatoAgarMedium
KAgar
*-* incubation media *-*
球漆斑菌 支/瓶
ColumbiaBloodAgar
马铃薯葡萄糖水 250g 用于椰毒假单胞酵米面亚种和真菌的增菌培养
YSG培养基250g用于清汁、浊汁、水和浓缩果汁中的耐热耐酸菌的检测。
Penicillin -Steptomycin 每毫升合剂含5000U*和5000U*,保存:-5 - -20° 15070-063 100ml Penicillin -Steptomycin 每毫升合剂含5000U*和5000U*,保存:-5 - -20° 15070-063 100ml
曲霉 模式菌株。产纤维素酶、蛋白酶 支/瓶
巧克力琼脂平板(9cm)用于嗜血杆菌、奈瑟氏菌分离培养
PotatoDextroseWater
(加*酶)