DNA 尿素 -PAGE 上样液10mL实验方法
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2017-01-17 14:11:24
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产品简介

DNA 尿素 -PAGE 上样液10mL实验方法运输及保存 常温运输、4℃保存(miRNAon、miRNA Marker 需要-20C 保存)。保存期为一年。

详细介绍

DNA 尿素 -PAGE 上样液10mL实验方法产品介绍:

DNA 尿素 -PAGE 上样液10mL实验方法使用方法:
一、准备工作 1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿(详见该产品的使用手册)。 2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍,得到 1X 电泳缓 冲液待用。 3. 配制 10%过硫酸铵溶液 精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中,按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,摇晃致溶, 立即使用。注意:放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶 1. 估计所需要的凝胶溶液的体积,一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液,配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶 需要 120 mL 凝胶溶液。 2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制:在装有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有 毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充 分摇晃混匀后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积,在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分 (此处以配制 100mL 浓度为 15%的凝胶为例):

4. 搅拌并加热到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷却到室温后,将三角瓶接上真空系统抽真空处理 10-15 分钟以充分去 除溶液中的氧气(氧气会降低聚合反应效率)。但如果实验条件有限,此 步也可以省略。
6. 边摇晃溶液变加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%过硫酸铵。注意:即 使选择其他工作浓度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%过硫酸铵的用 量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化,TEMED 和 10%过硫酸铵的用量也要按比例改变。
7. 再充分摇晃约 30 秒后迅速灌胶,然后插入样品梳。
8. 室温放置 30-60 分钟使胶凝固。
9. 将凝胶板放置在电泳装置上后,在上下层分别加入适当量的 1X 电泳缓冲 液。如果不马上使用,需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
10. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液,充分将每个加样空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。

产品及特点:
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是单独 配制各种溶液十分繁琐,为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式,含有电泳所需要的所有试剂,即开即用,十分方便,免去了 实验人员称取有毒物品。
2. 灵活,可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE,以便对长度各异 的 RNA 进行电泳。
3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自 显影等。
4. 使用新型缓冲液,可以防止甘油的干扰。
〖英文名称〗:β-D-Glucan
〖其他名称〗:β-D-葡聚糖
〖CAS号〗:9041-22-9
分子式:(C6H10O5)n
〖级别〗:BR
〖含量〗:≥80.0%(HPLC)
〖干燥失重〗:≤3.0%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:白色或类白色或黄褐色粉末。酵母来源,溶于水
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:2~8℃
肽聚糖
〖英文名称〗:PGN;Peptidoglycan
〖CAS号〗:27814-48-8
分子式:(C6H10O5)n

四硫磺酸钠亮绿增菌液基础(TTB)23040250g用于沙门氏菌选择性增菌培养(GB4789.4-2002)。
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R2AAgar
大豆酪蛋白消化物培养基 250g 一种通用的微生物培养基,用于多种微生物的培养(USP标准)
四硫磺酸钠煌绿增菌液基础(TTB)2303g用于沙门氏菌选择性增菌培养(《中华人民共和国药典》20。
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酵母粉琼脂250g用于水中细菌总数的检测(ISO标准)
液体连四盐培养基 250g 用于沙门氏菌选择性增菌培养。
匹克氏肉汤基础24090用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003中4.62,GB/T4789.03)。
赖氨酸培养基 (CM0191) Oxoid incubation media 赖氨酸培养基 (CM0191) Oxoid
日勾维肠杆菌 腐乳。 支/瓶
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肠杆菌的分离培养。
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