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一站式 miRNA 尿素 -PAGE 电泳套装30 次实验方法使用方法:
一、准备工作 1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿(详见该产品的使用手册)。 2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍,得到 1X 电泳缓 冲液待用。 3. 配制 10%过硫酸铵溶液 精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中,按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,摇晃致溶, 立即使用。注意:放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶 1. 估计所需要的凝胶溶液的体积,一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液,配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶 需要 120 mL 凝胶溶液。 2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制:在装有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有 毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充 分摇晃混匀后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积,在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分 (此处以配制 100mL 浓度为 15%的凝胶为例):
4. 搅拌并加热到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷却到室温后,将三角瓶接上真空系统抽真空处理 10-15 分钟以充分去 除溶液中的氧气(氧气会降低聚合反应效率)。但如果实验条件有限,此 步也可以省略。
6. 边摇晃溶液变加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%过硫酸铵。注意:即 使选择其他工作浓度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%过硫酸铵的用 量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化,TEMED 和 10%过硫酸铵的用量也要按比例改变。
7. 再充分摇晃约 30 秒后迅速灌胶,然后插入样品梳。
8. 室温放置 30-60 分钟使胶凝固。
9. 将凝胶板放置在电泳装置上后,在上下层分别加入适当量的 1X 电泳缓冲 液。如果不马上使用,需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
10. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液,充分将每个加样空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。
一站式 miRNA 尿素 -PAGE 电泳套装30 次实验方法产品及特点:
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是单独 配制各种溶液十分繁琐,为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式,含有电泳所需要的所有试剂,即开即用,十分方便,免去了 实验人员称取有毒物品。
2. 灵活,可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE,以便对长度各异 的 RNA 进行电泳。
3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自 显影等。
4. 使用新型缓冲液,可以防止甘油的干扰。
产品介绍:
〖级别〗:试剂级
〖含量〗:≥98.0%
〖干燥失重〗:25~28%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:白色或类白色粉末
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:-20℃
D-氨基半乳糖盐酸盐
〖英文名称〗:D-Galactosamine HC1;2-Amino-2-deoxy-D-galactose hydrochloride;D-Chondrosamine hydrochloride
〖其他名称〗:D-半乳糖胺盐酸盐;2-氨基-2-脱氧-D-半乳糖盐酸盐;D-软骨糖胺盐酸盐;2-氨基-2-脱氧-D-水解乳糖盐酸盐
〖CAS号〗:1772-03-8
C6H13NO5?HCl=215.63
〖级别〗:试剂级
〖含量〗:≥98.0%
〖干燥失重〗:≤1.0%
〖级别〗:试剂级
〖含量〗:≥98.0%
〖干燥失重〗:25~28%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:白色或类白色粉末
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:-20℃
D-氨基半乳糖盐酸盐
〖英文名称〗:D-Galactosamine HC1;2-Amino-2-deoxy-D-galactose hydrochloride;D-Chondrosamine hydrochloride
〖其他名称〗:D-半乳糖胺盐酸盐;2-氨基-2-脱氧-D-半乳糖盐酸盐;D-软骨糖胺盐酸盐;2-氨基-2-脱氧-D-水解乳糖盐酸盐
〖CAS号〗:1772-03-8
C6H13NO5?HCl=215.63
〖级别〗:试剂级
〖含量〗:≥98.0%
〖干燥失重〗:≤1.0%
0.5%*28032250g用于*等抗生素的无菌检查及消毒技术规范。(《中华人民共和国药典》20
Malt Extract 麦芽浸膏 500g incubation media Malt Extract 麦芽浸膏 500g
香茅醇假单胞菌 支/瓶
DCLSAgar
Lysozyme
液体硫乙醇酸盐培养基(FT)28030250g用于培养需氧菌、微需氧菌和厌氧菌,还用于药品生物制品的无菌试验,及食品中产气荚膜羧菌的厌氧...
Yeast Extract 酵母浸膏 500g incubation media Yeast Extract 酵母浸膏 500g
硝基还原假单胞菌 橡子糖化液发酵用菌 支/瓶
Honda250g用于致泻大肠埃希氏菌的产毒培养
水杨素 1g 进口分装,与HB116配套使用
新生霉素(改良E.C新生霉素增菌肉汤冻干配套试剂)SR00304.5mg/支x添加于225ml(028配成改良E.C新生霉素增菌肉汤。
HYLB-Capsules 培养基 5capsules incubation media HYLB-Capsules 培养基 5capsules
小被孢霉 用于橡子原料酿酒 支/瓶
HondaToxin-ProducingBroth
Salicin
改良麦康凯肉汤冻干配套试剂SR0240支添加于(025(025
Peptone 140 (Soytone) 蛋白胨-140 100g incubation media Peptone 140 (Soytone) 蛋白胨-140 100g
小肠结肠炎耶尔森氏菌 酒精酵母 支/瓶
大肠杆菌显色培养基l用于快速、准确检测大肠杆菌,培养24小时,显蓝绿色
MiddleBrook7H10琼脂 250g 用于分枝杆菌的分离培养
亚碲酸钾(*麦康凯培养基冻干配套试剂)SR0020g/支x添加于500ml(025配成*麦康凯培养基。
Peptone-A (From Meat) 蛋白胨A 100g incubation media Peptone-A (From Meat) 蛋白胨A 100g
小刺青霉 食用酵母 支/瓶
E.coliChromogenicMedium
MiddleBrook7H10Agar
改良EC新生霉素增菌肉汤基础(mEC+n)2850g用于致病性大肠杆菌O7的增菌培养(GB/T4789.36-2008,SN/T2006和SN/T0973-2000)。
Peptone-B (Soy Protein Enzymatic Hydrolysate) 蛋白胨B 500g incubation media Peptone-B (Soy Protein Enzymatic Hydrolysate) 蛋白胨B 500g
小红酵母 由AS2.346酵母育成,高温型水果酒酵母 支/瓶
肠道菌增菌肉汤250g用于肠杆菌科细菌的选择性增菌培养。
MiddleBrook7H11琼脂 250g 用于分枝杆菌的分离培养
改良麦康凯肉汤基础(CT-SMC)2550g用于大肠埃希氏菌07/NM的选择性增菌培养(GB/T4789.36-2008)。
Peptone-C (Peptonized Milk) 蛋白胨C 500g incubation media Peptone-C (Peptonized Milk) 蛋白胨C 500g
小皮伞 葡萄酒用菌 支/瓶
EEBroth
MiddleBrook7H11Agar
存和样品运输培养基0.5%*28032250g用于*等抗生素的无菌检查及消毒技术规范。(《中华人民共和国药典》20
Malt Extract 麦芽浸膏 500g incubation media Malt Extract 麦芽浸膏 500g
香茅醇假单胞菌 支/瓶
DCLSAgar
Lysozyme
液体硫乙醇酸盐培养基(FT)28030250g用于培养需氧菌、微需氧菌和厌氧菌,还用于药品生物制品的无菌试验,及食品中产气荚膜羧菌的厌氧...
Yeast Extract 酵母浸膏 500g incubation media Yeast Extract 酵母浸膏 500g
硝基还原假单胞菌 橡子糖化液发酵用菌 支/瓶
Honda250g用于致泻大肠埃希氏菌的产毒培养
水杨素 1g 进口分装,与HB116配套使用
新生霉素(改良E.C新生霉素增菌肉汤冻干配套试剂)SR00304.5mg/支x添加于225ml(028配成改良E.C新生霉素增菌肉汤。
HYLB-Capsules 培养基 5capsules incubation media HYLB-Capsules 培养基 5capsules
小被孢霉 用于橡子原料酿酒 支/瓶
HondaToxin-ProducingBroth
Salicin
改良麦康凯肉汤冻干配套试剂SR0240支添加于(025(025
Peptone 140 (Soytone) 蛋白胨-140 100g incubation media Peptone 140 (Soytone) 蛋白胨-140 100g
小肠结肠炎耶尔森氏菌 酒精酵母 支/瓶
大肠杆菌显色培养基l用于快速、准确检测大肠杆菌,培养24小时,显蓝绿色
MiddleBrook7H10琼脂 250g 用于分枝杆菌的分离培养
亚碲酸钾(*麦康凯培养基冻干配套试剂)SR0020g/支x添加于500ml(025配成*麦康凯培养基。
Peptone-A (From Meat) 蛋白胨A 100g incubation media Peptone-A (From Meat) 蛋白胨A 100g
小刺青霉 食用酵母 支/瓶
E.coliChromogenicMedium
MiddleBrook7H10Agar
改良EC新生霉素增菌肉汤基础(mEC+n)2850g用于致病性大肠杆菌O7的增菌培养(GB/T4789.36-2008,SN/T2006和SN/T0973-2000)。
Peptone-B (Soy Protein Enzymatic Hydrolysate) 蛋白胨B 500g incubation media Peptone-B (Soy Protein Enzymatic Hydrolysate) 蛋白胨B 500g
小红酵母 由AS2.346酵母育成,高温型水果酒酵母 支/瓶
肠道菌增菌肉汤250g用于肠杆菌科细菌的选择性增菌培养。
MiddleBrook7H11琼脂 250g 用于分枝杆菌的分离培养
改良麦康凯肉汤基础(CT-SMC)2550g用于大肠埃希氏菌07/NM的选择性增菌培养(GB/T4789.36-2008)。
Peptone-C (Peptonized Milk) 蛋白胨C 500g incubation media Peptone-C (Peptonized Milk) 蛋白胨C 500g
小皮伞 葡萄酒用菌 支/瓶
EEBroth
MiddleBrook7H11Agar
存和样品运输培养基