产品属性：

商品介绍：

测定意义

PEPCK（EC 4.1.1.32）广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中，催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸，是调节糖异生途径的关键酶。

测定原理：

PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PEPCK活性。

需自备的仪器和用品：

分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：

公司产品仅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存

试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

操作步骤：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

下列是公司正在热销的产品：

肝吸虫状腺原liver fluke

交替氧化甲状腺aldehyde oxidase

AFB1白蛋白游离甲状腺AFB1 albumin

c-fos游离状腺原c-fos

糖皮质受体β新生甲状腺glucocorticoid receptor-β

核转录因子p50胰岛NF-kappa-B p50

葡聚糖水合二激C肽glucan-water dikinase

V型ATP绒毛膜促性腺V-ATPases

酪绒毛膜促性腺βTyrosinase

胰凝乳蛋白促黄体Chymotrypsin

磷化MAP激相互作用丝,苏激松龙phosphorylated MAP kinase interacting serine,threonine kinas

新蝶呤瘦Neopterin

沙门氏菌抗体苗条受体Salmonella antigen antibody

肿廇蛋白P63生长Tumor Protein P63

细胞色P450 11A;B红生成Cytochrome P450 11A;B
PEPCK磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶微量法硝铬 99.95% metals basis异辛烷中5种有机氯农药混和溶液 基体:异辛烷Lp- Alpha(Mouse lipoprotein Alpha) ELISA Kit  小鼠脂蛋白α

硫钴，七水 AR，99.5%盐呋喃它酮  分析标准品，99.8%Big ET(Mouse Big Endothelin) ELISA Kit  小鼠大内皮

氯化钴 ACS reagent, 98% 胭脂红标准溶液0.50mg/ml,溶剂：水F VIII -Ag(Mouse coagulation factor VIII related antigen) ELISA Kit  小鼠Ⅷ相关抗原

硝镉,四水 99.99% metals basis金标准溶液100.0μg/g，基体:0.5mol/l盐F IX (Mouse Fcoagulation factor IX ) ELISA Kit  小鼠Ⅸ

硝镉,四水 99.999% metals basis钆标准溶液 1000µg/mL，基体：10%HClF X (Mouse coagulation factor X ) ELISA Kit  小鼠Ⅹ

氧化铬 99.95% metals basis三标准溶液0.001g/ml,溶剂:水vWF(Mouse von Willebrand Factor) ELISA Kit  小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉辅因子

乙镉 二水合物 99.99% metals basis三标准溶液0.0001g/ml,溶剂:水Pro-ANP(Mouse Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit  小鼠前心钠肽

钙黄绿 超纯级人参皂苷Rg1纯度标准物质 99.6×10-2NT-proBNP(Mouse N-terminal pro-brain natriuretic peptide) ELISA Kit  小鼠N端前脑钠

注意事项：

1、操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。