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商品介绍:
测定意义
蔗糖转化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据最适 pH,Ivr分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)两种类型。
AI的最适pH为3~5。AI分为可溶性AI(S-AI)和细胞壁不溶性AI(B-AI)两种类型。B-AI存在于细胞间隙并结合在细胞壁上,主要参与韧皮部质外体卸载时蔗糖的分解,以维持库源之间蔗糖的浓度。
测定原理:
B-AI催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与B-AI活性成正比。
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
BAI细胞壁不溶性酸性转化酶可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | FS-01S63594 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
兔促肾上腺皮质(ACTH)试剂盒 Anti-HSPB8 Antibody端粒相关蛋白1抗体
兔胆乙酰化(CHAc)试剂盒 Anti-HSPB6 Antibody谷酰转3抗体
兔脂联(ADP/Acrp30)试剂盒Anti-HSPD1 Antibody环指蛋白92抗体
兔核糖核抑制因子(RI)试剂盒Anti-HSPE1 Antibody环指蛋白调节蛋白激C蛋白抗体
兔成纤维生长因子9(FGF9)试剂盒Anti-HSPBAP1 AntibodyTRIM50蛋白抗体
兔谷脱羧1(GAD1)试剂盒Anti-HSPG2 Antibody环指蛋白88抗体
兔血红氧化2(HO2)试剂盒 Anti-HSPD1 Antibody(PB0301)锌指蛋白抑制NFκB蛋白抗体
兔B因子(BF)试剂盒 Anti-HSPH1 Antibody环指蛋白98抗体
兔多配体聚糖3(SDC3)试剂盒Anti-HSPG2 Antibody(PB0302)环指蛋白16抗体
兔周期D3(CCND3)试剂盒 Anti-HTR2A Antibody环指蛋白105抗体
兔前列腺E受体3(EP3)试剂盒Anti-HTR1A Antibody环指蛋白125抗体
兔CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)试剂盒 Anti-HSPH1 Antibody凝血(II)重链抗体
兔TATA框结合蛋白相关因子13(TAF13)试剂盒Anti-HTR3A Antibody转移生长因子β受体3抗体(TGF-βRⅢ,TGFβRⅢ)
兔载脂蛋白C3(ApoC3)试剂盒 Anti-HTRA3 Antibody辣椒受体抗体
兔叉头框蛋白P1(FOXP1)试剂盒Anti-HTR2B Antibody肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗体
BAI细胞壁不溶性酸性转化酶可见分光光度法氧化镝 ≥99.9% metals basis3,5-二氟甲 98%Human Protein S ELISA Kit 人蛋白S
氧化铒 99.99%4-氟-3-硝基三氟甲 99%sEPCR(Human soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 人可溶性血管内皮蛋白C受体
氧化铒 99.9% metals basis5-氟-2-硝 97%C/EBP Epsilon (Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon) ELISA Kit 人CCAAT增强子结合蛋白ε
氧化铕 99.9% metals basis2,4-二甲基吡 97%C/EBP Delta(Human CCAAT/enhancer binding protein deta) ELISA Kit 人CCAAT增强子结合蛋白δ
氧化钬 99.99% metals basis4-基三氟甲 98%C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit 人CCAAT增强子结合蛋白α
纳米氧化钬 99.9% metals basis,<100 nm particle size (BET)3,5-二基三氟甲 98%2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit 人2,3-二磷甘油
氧化镥 99.99% metals basis苄基三基溴化膦 98%LUM(Human lumican) ELISA Kit 人基膜聚糖/内腔蛋白
碳镧(III) 水合物 99%丁基三基氯化膦 98%NHE3(Human Na+/H+ exchanger 3) ELISA Kit 人Na+/H+交换体3