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商品介绍:
测定意义
ACP是一种在酸性环境下催化蛋白质水解的酶。该酶主要用于酒精发酵、啤酒酿造、毛皮软化、果酒澄清、酱油酿造、饲料等。
测定原理:
酸性条件下,ACP催化酪蛋白水解产生酪氨;在碱性条件下,酪氨还原磷钼酸化合物生成钨蓝;钨蓝在680nm有特征吸收峰,通过测定其吸光度增加,来计算ACP活性。
自备仪器和样品:
水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、0.5 mL EP管和蒸馏水。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
酸性蛋白酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/48样 | FS-01S63507 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
猪BCL2修饰因子(BMF)试剂盒Human ZNF571 ELISA Kit富含亮跨膜纤连蛋白1抗体
猪垂草扁桃(VMA)试剂盒 Human ZNF346 ELISA Kit富含亮跨膜纤连蛋白2抗体
猪性结合球蛋白(SHBG)试剂盒Human ZNF34 ELISA Kit富含亮跨膜纤连蛋白3抗体
猪组织转谷酰(TGM2)试剂盒Human ZNF446 ELISA Kit牛纤维蛋白原抗体
猪G蛋白偶联受体120(GPR120)试剂盒Human RBP1(Retinol-binding protein 1) ELISA KitFAM172A蛋白抗体
猪原纤维蛋白2(FBN2)试剂盒Human ZNF557 ELISA Kit磷化粘着斑激抗体
猪封闭蛋白14(CLDN14)试剂盒 Human ZNF35 ELISA Kit磷化粘着斑激抗体
猪血管生成样蛋白4(ANGPTL4)试剂盒 Human ZNF593 ELISA Kit磷化脆性组三联体抗体
猪菌性/通透性增加蛋白(BPI)试剂盒 Human ZNF571 ELISA Kit磷化FRA-1蛋白抗体
猪球蛋白E(IgE)试剂盒Human ZNF460 ELISA Kit磷化Fas相关死亡结构域蛋白抗体
猪外基质蛋白1(ECM1)试剂盒Human ZNF470 ELISA Kit磷化性成纤维生长因子受体1抗体
猪甘露聚糖结合凝集相关丝蛋白2(MASP2)试剂盒Human ZNF48 ELISA Kit磷化叉头蛋白家族抗体
猪白介15(IL-15)试剂盒Human ZNF486 ELISA Kit磷化叉头蛋白3A抗体
猪脂蛋白a(LP-a)试剂盒Human ZNF483 ELISA Kit磷化叉头蛋白3A抗体
猪干因子受体(SCFR/c-Kit)试剂盒Human ZNF488 ELISA Kit磷化叉头蛋白3A抗体
酸性蛋白酶检测试剂盒微量法乙二乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)衣康 AR,99.8%Anti-IL-1 Beta/FITC 荧光标记白介1β抗体IgG
乙二丁 GCS, ≥99.5% (GC)曲 99%Anti-IL-1ra/FITC 荧光标记白介-1受体拮抗剂抗体IgG
曙红Y(水溶) AR,80%乙基环己烷 99%Anti-IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist) /FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠、猪、牛、羊、犬白介-1受体拮抗剂抗体IgG
EDTA二钠钴 AR甲基环己烷 99%Anti-IL-1R I /FITC 荧光标记白介1受体Ⅰ抗体IgG
乙二四乙铁钠 植物培养级氟化,二水 CPAnti-IL-1R II /FITC 荧光标记白介1受体Ⅱ抗体IgG
氟罗里硅土 60-100 目氟化,无水 AR,粉末Anti-IL1RAPL1 /FITC 荧光标记白介受体相关蛋白样1前体蛋白抗体IgG
三十六烷 AR,96%氟化,无水 GR,粉末Anti-IL-2/FITC 荧光标记白介2抗体IgG
三十六烷 Standard for GC, ≥98% (GC)钯粉 99.9% metals basis,粒径0.5μmAnti-IL-2/FITC 荧光标记白介2抗体(人) IgG