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商品介绍:
测定意义
甜菜碱是一种广泛分布于动植物及微生物体内的季铵型水溶性生物碱,是生物体内胆的氧化产物,可以增强免疫力、降血脂、抗氧化、抗肿瘤,并可作为甲基供体,参与促进动物蛋白质和脂肪代谢、增进食欲、缓和应激、调节渗透压、稳定维生素等多种生物作用,在化工、医药、食品添加剂等领域有较广泛的应用。
测定原理
甜菜碱在强酸条件下和雷氏盐发生反应产生沉淀,沉淀用丙酮溶解形成红色溶液,在525nm处有特征吸收峰,测定525nm处的吸光值,可得样品的甜菜碱含量。
自备实验用品及仪器
天平、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、甲醇、盐酸和蒸馏水。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
甜菜碱含量检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63813 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
107kDa肌多聚磷-4-磷Ⅰ型(INPP4A)检测试剂盒(联吸附试验法)光帽鳞伞Sheep 5-NT (5-Nucleotidase) ELISA Kit
107kDa肌多聚磷-4-磷Ⅰ型(INPP4A)检测试剂盒(联吸附试验法)肠杆属Sheep PICK1 (Protein Interacting With Protein Kinase C, Alpha 1)ELISA Kit
层粘连蛋白β3(LAMβ3)检测试剂盒(联吸附试验法)明尼苏达被毛孢Sheep TP63 (Tumor Protein p63) ELISA Kit
融合蛋白(FUS)检测试剂盒(联吸附试验法)嗜热链球Sheep α1BG (Alpha-1-B-Glycoprotein) ELISA Kit
黑转铁蛋白(MFI2)检测试剂盒(联吸附试验法)暗孢节菱孢Sheep GAP43 (Growth Associated Protein 43) ELISA Kit
视变诱导反应蛋白(OPTN)检测试剂盒(联吸附试验法)巴氏芽孢杆Sheep SYP (Synaptophysin) ELISA Kit
8-羟基鸟糖苷1(OGG1)检测试剂盒(联吸附试验法)大肠埃希Sheep CKMB (Creatine Kinase MB Isoenzyme) ELISA Kit
尿嘧DNA糖基化(UNG)检测试剂盒(联吸附试验法)短芽孢杆Sheep MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit
胸苷嘧DNA糖基化(TDG)检测试剂盒(联吸附试验法)枯草芽孢杆Sheep TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit
单链选择性单功能尿嘧DNA糖基化1(SMUG1)检测试剂盒(联吸附试验法)球孢白僵Sheep Salusin α (Salusin Alpha) ELISA Kit
N-甲基DNA糖基化(MPG)检测试剂盒(联吸附试验法)枯草芽胞杆Sheep COX-2R (Cyclooxygenase-2 Receptor) ELISA Kit
MutY同源物(MUTYH)检测试剂盒(联吸附试验法)胶孢Sheep TUBβ (β-Tubulin) ELISA Kit
激活蛋白C(APC)检测试剂盒(联吸附试验法)黄杆Sheep GMP-140 (Alpha-granular Membrane Protein) ELISA Kit
激活蛋白C(APC)检测试剂盒(联吸附试验法)新日本灵芝Sheep PKM2 (Pyruvate Kinase, Muscle) ELISA Kit
嗜铬蛋白B(CHGB)检测试剂盒(联吸附试验法)烬灰链霉Sheep RXFP1 (Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1) ELISA Kit
甜菜碱含量检测试剂盒微量法小鼠垂体腺苷环化激活肽Anti-MPHOSPH10 Antibody人神经穿透2(NPTX2)elisa定量检测试剂盒
人内质网应激相关蛋白CHOPAnti-MPHOSPH9 Antibody人丝裂原激活蛋白激(MAPK)elisa定量检测试剂盒
大鼠Ⅰ型胶原C端肽Anti-MPL/TPOR Antibody人轻肽铁蛋白(FTL)elisa定量检测试剂盒
人可溶性瘦受体Anti-MPRIP Antibody人细丝蛋白Bβ(FLNβ)elisa定量检测试剂盒
小鼠抗PSGL-1/CD162 ELISA KitAnti-MRC1 Antibody人髓分化因子88(MyD88)elisa定量检测试剂盒
家蚕卵黄蛋白Anti-MPO Antibody人糖化血红蛋白(HbA1c)elisa定量检测试剂盒
兔抗脑组织抗体Anti-MRC1 Antibody人特异性巨噬武装因子(SMAF)elisa定量检测试剂盒
蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原Anti-MRE11 Antibody人纤溶抑制因子(TAFI)elisa定量检测试剂盒