MS苹果酸合酶检测试剂盒微量法

MS苹果酸合酶检测试剂盒微量法

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2022-03-14 15:55:30
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产品简介

MS苹果酸合酶检测试剂盒微量法的热销的产品:西伯利亚库特氏菌3-磷甘油醛脱氢(GAPDH)活性终点比色法定量检测试剂盒
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详细介绍

商品介绍:

测定意义

苹果酸合酶(MS,EC 4.1.3.2)是属于转移酶中酰基转移酶的一类,主要存在于植物和微生物中。MS是乙醛酸循环的关键酶之一,在MS催化下乙醛酸与乙酰辅酶反应生成苹果酸。

测定原理:

MS催化乙酰CoA和乙醛酸产生苹果酸,同时生成辅酶,辅酶使无色的DTNB转变成黄色的TNB,在 412nm处有特征吸光值。

需自备的仪器和用品:

酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板、研钵、冰、和蒸馏水
产品属性:

产品名称

检测方法

规格

货号

MS苹果酸合酶检测试剂盒微量法

微量法

100管/96样

FS-01S63485

产品内容:

酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;

碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存

试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;

试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;

试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;

试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;

试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

 

11.png 

操作步骤:

一、NAD+和 NADH 的提取:

1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:

NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:

NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:

NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。

注意事项:

1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。

下列是公司正在热销的产品:

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MS苹果酸合酶检测试剂盒微量法乙镉 二水合物 CP2.4-D丁酯标准溶液 100μg/ml,u=3%LN(Mouse Laminin) ELISA Kit  小鼠层连蛋白/板层

氯化铜,二水 CP2.5-D丁酯标准溶液10μg/ml,u=6%,溶剂:正己烷M-CSF(Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA Kit  小鼠巨噬集落激因子

氯化铜,二水 AR1,1-二氯乙烷标准溶液 0.96mg/ml,基体:甲MDC/CCL22(Mouse Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit  小鼠巨噬来源的趋化因子

氯化铜,二水 ACS反式-1,2-二氯乙烯标准溶液 0.87mg/ml,基体:甲RANTES/CCL5(Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA Kit  小鼠正常T表达和分泌因子

氯化铜,二水 99.99% metals basis二标准溶液 499mg/L,基体:甲叔丁MIP-2(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2) ELISA Kit  小鼠巨噬炎性蛋白2

氯化铜,二水 99.999% metals basis邻二甲二甲酯标准溶液 230.0μg/mL,溶剂:甲OT(Mouse oxytocin) ELISA Kit  小鼠催产

 硝铜,三水 AR,99%邻二甲二乙酯标准溶液 238.0μg/mL,溶剂:甲MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Mouse macrophage inflammatory protein 3 Beta) ELISA Kit  小鼠巨噬炎性蛋白3β

硝铜,三水  CP,98%邻二甲二正丁酯标准溶液 195.0μg/mL,溶剂:甲NTX(Mouse cross linked N-opeptide of type I collagen) ELISA Kit  小鼠Ⅰ型胶原N末端肽

 


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