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商品介绍:
测定意义
苹果酸合酶(MS,EC 4.1.3.2)是属于转移酶中酰基转移酶的一类,主要存在于植物和微生物中。MS是乙醛酸循环的关键酶之一,在MS催化下乙醛酸与乙酰辅酶反应生成苹果酸。
测定原理:
MS催化乙酰CoA和乙醛酸产生苹果酸,同时生成辅酶,辅酶使无色的DTNB转变成黄色的TNB,在 412nm处有特征吸光值。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板、研钵、冰、和蒸馏水
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
MS苹果酸合酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63485 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
豚鼠可溶性血管内皮蛋白C受体(sEPCR)联免疫试剂盒膜醭毕赤酵母Human MUC17 (Mucin 17) ELISA Kit
豚鼠表皮角蛋白(EK)联免疫试剂盒 嗜冷杆*Human MUC2 (Mucin 2) ELISA Kit
豚鼠高分子量角蛋白(CK-HMW)联免疫试剂盒 白色短波单胞Human MUC20 (Mucin 20) ELISA Kit
豚鼠神经调节蛋白3(NRG-3)联免疫试剂盒假单胞Human CNR1 (Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit
豚鼠半胱天冬3(CASP3)联免疫试剂盒蜡样芽孢杆Human CAP1 (Adenylate Cyclase Associated Protein 1) ELISA Kit
豚鼠红藻离子型谷受体2(GRIK2)联免疫试剂盒 拟茎点霉Human CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit
豚鼠小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)联免疫试剂盒白僵Human CA19-9 (Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit
豚鼠基质衍生因子4(SDF-4)联免疫试剂盒褐孢大秃马勃Human CDT (Carbohydrate Deficient Transferrin) ELISA Kit
豚鼠抗核膜糖蛋白210抗体(AGPA)联免疫试剂盒 多根硬皮马勃Human CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit
豚鼠外信号调节激(ERK)联免疫试剂盒 大肠埃希氏杆Human CA2 (Carbonic Anhydrase II) ELISA Kit
豚鼠色b-561(CYB561)联免疫试剂盒 侧耳Human HbCO (Carboxyhemoglobin) ELISA Kit
豚鼠蛋白磷(PP)联免疫试剂盒孔球孢霉Human CEA (Carcinoembryonic Antigen) ELISA Kit
豚鼠干扰诱导Tα亚族趋化因子 (I-TAC)联免疫试剂盒热带根瘤Human ANKRD1 (Ankyrin Repeat Domain 1) ELISA Kit
豚鼠球蛋白A1 (IgA1)联免疫试剂盒重金属铅速测试剂包Human cTT/TNNT2 (Troponin T Type 2, Cardiac) ELISA Kit
豚鼠肿瘤坏死因子配体相关分子-1A(TL1A)联免疫试剂盒粗皮马勃Human CMLC-1 (Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit
MS苹果酸合酶检测试剂盒微量法乙镉 二水合物 CP2.4-D丁酯标准溶液 100μg/ml,u=3%LN(Mouse Laminin) ELISA Kit 小鼠层连蛋白/板层
氯化铜,二水 CP2.5-D丁酯标准溶液10μg/ml,u=6%,溶剂:正己烷M-CSF(Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA Kit 小鼠巨噬集落激因子
氯化铜,二水 AR1,1-二氯乙烷标准溶液 0.96mg/ml,基体:甲MDC/CCL22(Mouse Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit 小鼠巨噬来源的趋化因子
氯化铜,二水 ACS反式-1,2-二氯乙烯标准溶液 0.87mg/ml,基体:甲RANTES/CCL5(Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA Kit 小鼠正常T表达和分泌因子
氯化铜,二水 99.99% metals basis二标准溶液 499mg/L,基体:甲叔丁MIP-2(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2) ELISA Kit 小鼠巨噬炎性蛋白2
氯化铜,二水 99.999% metals basis邻二甲二甲酯标准溶液 230.0μg/mL,溶剂:甲OT(Mouse oxytocin) ELISA Kit 小鼠催产
硝铜,三水 AR,99%邻二甲二乙酯标准溶液 238.0μg/mL,溶剂:甲MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Mouse macrophage inflammatory protein 3 Beta) ELISA Kit 小鼠巨噬炎性蛋白3β
硝铜,三水 CP,98%邻二甲二正丁酯标准溶液 195.0μg/mL,溶剂:甲NTX(Mouse cross linked N-opeptide of type I collagen) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型胶原N末端肽