商品介绍：

测定意义

丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase，PC，EC 6.4.1.1)广泛存在于动物、霉菌和酵母的线粒体中，催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，是糖异生过程的第一个限速酶，在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。

测定原理：

PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+，在340nm下测定NADH氧化速率，即可反映PC活性。

需自备的仪器和用品：

分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品属性：

产品内容：

酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存

试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

操作步骤：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

注意事项：

1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。

下列是公司正在热销的产品：

胆囊收缩/肠促肽A受体(CCKAR)试剂盒 Human KIF1C ELISA Kit丁酰基A合成3抗体

胆囊收缩/肠促肽B受体(CCKBR)试剂盒 Human KIF19 ELISA Kit脂肪源性亮基肽抗体（血管内皮生长因子诱导蛋白）

胆囊收缩八肽(CCK-8)试剂盒 Human KIF20A ELISA Kit线粒体凋亡诱导因子2抗体

胆酯转移蛋白(CETP)试剂盒Human KIF26B ELISA KitABL2蛋白抗体

着丝粒蛋白F(CENPF)试剂盒 Human KIF22 ELISA Kit血管紧张转换ACE1抗体

胆乙酰化(CHAc)试剂盒  Human KIF2B ELISA Kit血管紧张转换2抗体

胆磷甘油酯(PC/CPG)试剂盒 Human KIF2C ELISA KitAcinus抗体

蕈型胆受体M2(CHRM2)试剂盒Human KIF2A ELISA Kit醋激1抗体

硫软骨(CS)试剂盒  Human KIF3A ELISA Kit促肾上腺皮质(1-39)抗体

绒毛膜促性腺β(CGβ)试剂盒 Human KIAA0125 ELISA Kit促肾上腺皮质ACTH(18-39)抗体

碳酐XII(CA12)试剂盒Human KIAA0087 ELISA Kit促肾上腺皮质ACTH (7-23)抗体

染色盒同源物3(CBX3)试剂盒Human KIAA0141 ELISA Kit活性依赖的神经保护肽抗体

染色质区解旋DNA结合蛋白3(CHD3)试剂盒Human KIAA0182 ELISA Kitα1性糖蛋白1/类粘蛋白1抗体

染色质区解旋DNA结合蛋白5(CHD5)试剂盒Human KCTD5 ELISA Kitα1性糖蛋白2抗体（类粘蛋白2）

嗜铬蛋白A/胰抑制(CgA/Pancreastatin)试剂盒  Human KIAA0430 ELISA Kit磷化水通道蛋白2抗体
PC丙酮酸羧化酶检测试剂盒紫外分光光度法硝 68.0 - 70.0 %, 99.999% (metals basis)1-氯丁烷 99.8%IL-1 Beta (Rabbit Interleukin 1 Beta) ELISA Kit  兔白介1β

草 99.99% metals basis氯代异烷 GR,99%IL-6 (Rabbit Interleukin 6) ELISA Kit  兔白介6

草 ≥99.9999% (metals basis)氯代叔丁烷 99%IL-10 (Rabbit Interleukin 10) ELISA Kit  兔白介10

橙黄Ⅰ Biological stain氯代十六烷 97%TNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha) ELISA Kit  兔子肿瘤坏死因子α

橙黄Ⅰ Indicator氯代异丁烷 98%TGF- Beta (Rabbit Transforming Growth factor Beta) ELISA Kit  兔子转化生长因子β

焦硫 99.99% metals basis氯代环己烷 99%bFGF (Rabbit basic fibroblast growth factor) ELISA Kit  兔子性成纤维生长因子

硫氢 AR，99%氯代十四烷 98%PGE2 (Rabbit Prostaglandin E2) ELISA Kit  兔子前列腺E2

硫氢 CP，99%氯代正烷 99%5-HT (Rabbit 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit  兔子5羟色