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以下是衣原体通用PCR检测试剂盒的订购信息:
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
3,7-二氮杂双环[3.3.0]辛烷 5840-00-6
聚乙二醇单辛基苯基醚 9002-93-1
2-硝基-4-(三氟甲氧基) 2267-23-4
BOC-(R)-3-氨基-4-(3-氟苯基)-丁酸 331763-66-7
(1-甲基-4-哌啶-)乙酸 7149-42-0
磺胺灭脓 138-39-6
2,5-二溴噻唑 4175-78-4
2-氨基-1,3-苯二酚 3163-15-3
5-溴-1-萘甲酸 16726-67-3
1H-吲哚-2-甲醛 19005-93-7
2-氯-6-甲基吡嗪 38557-71-0
8-羟基-1,2,3,4-四氢喹啉 6640-50-2
水杨醇 1990-1-7
BOC-(S)-3-氨基-4-(4-溴苯基)-丁酸 270062-85-6
孕烯醇酮 145-13-1
1-氯-1-苯乙烷 672-65-1
1,3-苯并噻唑-2-羧酸乙酯 32137-76-1
8-溴辛酸 17696-11-6
(S)-3-氨基-4-(4-溴苯基)-丁酸盐酸盐 270062-84-5
2-氯-4-氟苯硼酸 313545-72-1
D-2-氰基苯丙氨酸 263396-41-4
L-4-氰基苯丙氨酸 167479-78-9
2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧)吡啶 444120-94-9
硝酸纤维素 9004-70-0
淀粉 9005-25-8
麦芽糖糊精 9050-36-6
二甲基乙二醛肟 95-45-4
4-异丙基甲苯 99-87-6
N-苯甲酰-DL-丙氨酸 1205-02-3
1,4-二溴-2-氟苯 1435-52-5
3-哒嗪酮 504-30-3
Boc-甘氨酸酰肼 6926-9-6
2,6-二氯-4-氟苯胺 344-19-4
四乙酰核糖 28708-32-9
对硝基苯甲酰胺 619-80-7
2-溴-5-氟硝基苯 446-09-3
(1S,3R)-N-BOC-1-氨基环戊烷-3-羧酸 161660-94-2
3-氯-4-基三氟甲苯 141738-80-9
硫酸钾 7778-80-5
硫酸铝铵.十二水合物 7784-26-1
蒎烯 7785-70-8
磷酸氢钙 7789-77-7
柠檬酸三乙酯 77-93-0
衣原体通用PCR检测试剂盒2-丁酮 78-93-3
丁香油 8000-34-8
蓖麻油 8001-79-4
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。