品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
Cy5-dCTP溶液 | 5ul (10 mM)、25ul (10 mM)、100ul (10 mM) | YSR96321 |
分子式:
化学性质:
Physical Appearance:Solution Storage:Store at -20°C or below M.Wt:1158.0 (free acid) Formula: C45H56N6O20P3S2 (free acid) Synonyms:Cyanine 5-5-Propargylamino-2'-deoxycytidine-5'-Triphosphate,Cy5-dCTP Chemical Name:tetralithium mono(2-((1E,3E,5E)-5-(1-(6-((3-(4-amino-1-(4-hydroxy-5-(((oxido((oxido(phosphonatooxy)phosphoryl)oxy)phosphoryl)oxy)methyl)tetrahydrofuran-2-yl)-2-oxo-1,2-dihydropyrimidin-5-yl)prop-2-yn-1-yl)amino)-6-oxohexyl)-3,3-dimethyl-6-sulfonatoindolin SDF:Download SDF Canonical SMILES:NC(C(C#CCNC(CCCCCN1C2=C(C=CC(S(=O)([O-])=O)=C2)C(C)(C)/C1=C\C=C\C=C\C3=[N+](CC)C(C=C(S(=O)([O-])=O)C=C4)=C4C3(C)C)=O)=CN5C6CC(O)C(COP([O-])(OP([O-])(OP([O-])([O-])=O)=O)=O)O6)=NC5=O.[Li+].[Li+].[Li+].[Li+] 运输条件蓝冰运输或根据您的需求运输。 一般建议为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。