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以下是牛呼肠孤病毒PCR检测试剂盒的订购信息:
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
双(二异丙基氨基)(2-氰基乙氧基)膦 102691-36-1
三乙醇胺 102-71-6
3,5-二甲氧基苯胺 10272-07-8
102-82-9
硫酸银 10294-26-5
三溴化硼 10294-33-4
三氯化硼 10294-34-5
4-甲砜基苯乙酮 10297-73-1
4-氯-3-硝基苯甲醚 10298-80-3
(R)-1-BOC-3-羟基吡咯烷 103057-44-9
2-氨基-6-氯嘌呤 10310-21-1
2-氯-5-硝基嘧啶 10320-42-0
D-阿拉伯糖 10323-20-3
二苄胺 103-49-1
喹啉-6-羧酸 10349-57-2
beta-溴代苯乙烷 103-63-9
N-甲基苄胺 103-67-3
N-苯基甲酰胺 103-70-8
硫代异 103-72-0
苯 103-73-1
1-(2-羟乙基)酸盐 103-76-4
基化锂(无水) 10377-51-2
基化镁 10377-58-9
苯乙酰氯 103-80-0
苯乙酸 103-82-2
N-乙酰苯胺 103-84-4
硫代乙酸钾 10387-40-3
4-甲基乙酰苯胺 103-89-9
N-乙酰对氨基酚 103-90-2
烟酰氯 10400-19-8
对甲氧基苯乙酸 104-01-8
4-氰基苯 10406-25-4
N-芴甲氧羰基-D-谷氨酸 gamma-叔丁酯 104091-08-9
N-(4-氯苄基)-N-乙酸 104-11-0
对氯苯异氰酸酯 104-12-1
对甲苯磺酸 104-15-4
N,O-双*硅基乙酰胺 10416-59-8
5-氯-2-甲基苯甲酸 1042-81-5
2-(甲砜基)乙胺盐酸盐 104458-24-4
对甲氧基基甲酯 104-47-2
高基酸 10450-60-9
肉桂醇 104-54-1
偶氮二甲酰二哌啶 10465-81-3
(R)-3-羟基吡咯烷盐酸盐 104706-47-0
BOC-D-谷氨酸5-叔丁酯 104719-63-3
邻羟基苯乙酮 104809-67-8
4-甲基溴苄 104-81-4
4-氯氯苄 104-83-6
4-甲基苄胺 104-84-7
牛呼肠孤病毒PCR检测试剂盒对甲苯腈 104-85-8
对氯苄胺 104-86-9
对甲基基吡唑 104-87-0
反-丁烯酰氯 10487-71-5
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。