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以下是博尔纳病病毒PCR检测试剂盒的订购信息:
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
NiacinassayMedium 100g原装 BD 232210
Nicotinicacid 25g/100g/500g/1kg原装 Sigma N4126
(烟酸
(尼古丁酸VitaminB3))
N-LauroylSarcosineSodium 50g/100g/250g/1kg Amresco 0719
(十二烷基肌氨酸钠)
N-Octyl-b-D-Glucopyranoside 250mg/1g/5g INALCO原装
(n-辛基-b-D-吡喃葡萄糖苷)
N-Octyl-b-D-Thioglucopyranoside 1g 原装 Amresco J575
(n-辛基-b-D-硫代毗喃葡萄糖苷)
NutrientAgar 100g原装/500g原装 BD 212000
(营养琼脂)
NutrientBroth 100g/500g/北京250g BD 233000
(营养肉汤)
Nystatin 100mg原装/1g原装 INALCO1758-9323
(Mycostatin)(制霉菌素)
OilRedO 25g/50g/250g原装 Amresco 0684
(油红O(苏丹红5B))
OPD 5g/10g/50g/250g原装 Amresco 0688
(邻苯二胺)
Paclobutrazol 10g/250g 国产
(多效唑)
PalcamMediumBase 500g原装 BD 263620
Palmiticacid 10g原装/25g原装 Sigma P0500
(棕榈酸)
Papain 5g/25g/100g原装 Sigma P3250
(木瓜蛋白酶)
Paraformaldehyde 100g/250g/1kg/5kg原装 Sigma P6148
(多聚甲醛)
Pectin 25g/100g/500g/1kg原装 Sigma P9135
(果胶)
PectolaseY-23 100mg/500mg/1g/10g原装 Yakult.JAPAN
(果胶酶Y-23)
PEG12000 100g /1kg 原装 Fluka 81285
(聚乙二醇12000)
PEG20000 250g/500g/1kg/5kg 原装 Merck 818897
(聚乙二醇20000)
PEG3350 100g/250g Sigma分装
(聚乙二醇3350)
PEG400 200g Sigma分装
(聚乙二醇400)
PEG4000 250g/500g/1kg/5kg原装 Merck 817006
(聚乙二醇4000)
博尔纳病病毒PCR检测试剂盒PEG6000 200g Sigma分装
(聚乙二醇6000)
PEG8000 200g/500g Amresco分装
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。