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百日咳波氏杆菌PCR检测试剂盒具有下列特点:
1. 一站式,足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 体系计算),但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂(如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂)。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合,适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组,需从本公司采购 AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3. 各种参数都经过优化,一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间,可重复 性好,误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如动物和植物),对于基因组 在 50-500 Mb 的材料(如细菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如质粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 种)AFLP 引物对。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
Percoll 100ml/1L 原装 Pharmacia17089101
(细胞分离液)
Peroxidase 10mg/100mg 国产
(Horseradish)辣根过氧化物酶
PHA-P 5mg/10mg Sigma分装
(植物凝集素P)
PhenazineMethosulfate 1g /5g /10g/25g Amresco 0361
(PMS)(吩嗪硫酸甲酯)
Phenol 250ml 国产
(重蒸酚)
Phenol:Water 250ml 国产
(水饱和酚)
Phosphatidylcholine 25mg/100mg/250mg Sigma P4279
(EggYolk)(蛋黄卵磷脂)
Phosphatidylcholine 10g/1kg 国产
(EggYolk)(蛋黄卵磷脂)
Phosphatidylcholine 25g/100g/500g/1kg原装 Sigma P5638
(Soy)(大豆卵磷脂)
PHStandardSET set Amresco分装
(PH标准液)
Phytagel 50g/100g/250g/500g Sigma P8169
(Geuamgum)(植物凝胶)
Phyticaciddodecasodiumsalt 10g/25g/100g原装 Sigma P0109
(植酸钠)
PIkit 1vial原装/10vial原装 Pharmacia17047201
百日咳波氏杆菌PCR检测试剂盒(电泳等电点标准PH2.5-6.5)
PIkit 1vial原装/10vial原装 Pharmacia17047101
(电泳等电点标准PH3.5-9.3)