产品内容：

酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存

试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

产品属性：

商品介绍：

测定意义

PFK（EC 2.7.1.11）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，负责将果糖-6-磷酸和ATP转化为果糖-1,6二磷酸和ADP，是糖酵解过程的关键调节酶之一。

测定原理

PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PFK活性。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

注意事项：

1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。

操作步骤：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

下列是公司正在热销的产品：

猴桥粒斑蛋白(DSP)试剂盒Human OTOP3 ELISA Kit酪磷受体相互作用蛋白Liprin α1抗体

猴色P450家族成员24A1(CYP24A1)试剂盒 Human OTOR ELISA Kit线粒体离子肽1抗体

猴CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)试剂盒Human P4HA3 ELISA Kit微管相关蛋白轻链3C抗体

猴胱天蛋白4(CASP4)试剂盒 Human USO1(Protein USO1 homolog) ELISA Kit假定肿瘤抑制亮拉链蛋白1抗体

猴白介1β(IL-1β)试剂盒Human p130Cas ELISA Kit乳脱氢LDH-C（肿瘤/抗原32）抗体

猴电子转移黄蛋白β肽(ETFβ)试剂盒 Human p150 glued ELISA Kit肿瘤抑制基因LUCA15抗体

猴畸胎瘤衍生生长因子1(TDGF1)试剂盒Human P15RS ELISA Kit特异性转运蛋白1抗体

猴低分子质量蛋白7/β型蛋白体9(LMP7/PSMB9)试剂盒Human p19 INK4d ELISA KitRNA聚合相关蛋白LEO1抗体

猴普通急性白血病抗原(CALLA)试剂盒  Human ACP5(TartRate-resistant acid phosphatase type 5) ELISA Kit磷化低密度脂蛋白受体相关蛋白6抗体

猴保护(CD59)试剂盒Human OVCA2 ELISA Kit磷化特异性蛋白酪激抗体

猴乙酰胆酯(AChE)试剂盒  Human OVCA1 ELISA Kit低密度脂蛋白受体相关蛋白5抗体

猴骨髓前体抑制因子1(MPIF-1/CCL23)试剂盒Human OVOL1 ELISA Kit磷化低密度脂蛋白受体相关蛋白5抗体

猴基质金属蛋白24(MMP-24)试剂盒Human OXA1L ELISA Kit磷化低密度脂蛋白受体相关蛋白1抗体

猴纤维介蛋白(FGL2)试剂盒  Human Osteoglycin ELISA Kit苏蛋白激LKB1抗体

猴半乳凝集2(GAL2)试剂盒Human HABP1/C1QBP(Hyaluronan Binding Protein 1) ELISA Kit低分子量蛋白7抗体
PFK磷酸果糖激酶检测试剂盒微量法乙汞 分析标准品（剧品）氟化铝 99.9% metals basisAnti-phospho-IKK alpha (Tyr463) /FITC  荧光标记磷化核因子κB激alpha抑制剂抗体IgG

2,4,6-三(二甲基) 95%氟铝铵  98%Anti-phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC  荧光标记磷化核因子κB激alpha抑制剂抗体IgG

三叔丁氧基氢化铝锂 97%乙钴，四水 99.9% metals basisAnti-Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) /FITC  荧光标记磷化核因子κB激alpha/beta抑制剂抗体IgG

氢化锂 95%硫钴，七水 AR，99.5%Anti-Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) /FITC  荧光标记磷化核因子κB激alpha/beta抑制剂抗体IgG

氢化锂 2.0M四溶液硫钴，七水 99.99% metals basisAnti-phospho-IKK beta (Tyr466) /FITC  荧光标记磷化核因子κB激beta抑制剂抗体IgG

三仲丁基氢化锂 1M THF溶液式碳镍 ARAnti-phospho-IKK beta (Tyr199) /FITC  荧光标记磷化核因子κB激beta抑制剂抗体IgG

三叔丁氧基氢化铝锂 1.0 M in THF邻二甲酰亚 99%Anti-phospho-IKK beta (Tyr188) /FITC  荧光标记磷化核因子κB激beta抑制剂抗体IgG

绿原 95%1,3,5- CP,97%Anti-IL-4/FITC   荧光标记白介4抗体IgG