产品内容：

酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存

试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

产品属性：

商品介绍：

测定意义

PK（EC 2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP的关键酶之一，因此测定PK活性具有重要意义。

测定原理

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PK活性。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水

注意事项：

1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。

操作步骤：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

下列是公司正在热销的产品：

小鼠钙结合蛋白S100A11(S100A11) 试剂盒Human SMOX(Spermine oxidase) ELISA Kit4号染色体开放阅读框51抗体

小鼠钙结合蛋白S100A7(S100A7) 试剂盒Human AMOT(Angiomotin) ELISA Kit分支GBE1抗体

小鼠S100钙结合蛋白B (S100B) 试剂盒Human CASP7(Caspase-7) ELISA Kit磷化丝切蛋白抗体

小鼠钙结合蛋白S100A6(S100A6) 试剂盒Human NEFH(Neurofilament heavy polypeptide) ELISA Kit补体成分5受体1抗体

小鼠S100钙结合蛋白A12(S100A12 )试剂盒Human HSD11B1(Corticosteroid 11-beta-dehydrogenase isozyme 1) ELISA Kit分裂周期2样蛋白激6抗体

小鼠山梨脱氢(SDH)试剂盒Human SEMA3A(Semaphorin-3A) ELISA Kit补体C3IP1抗体

小鼠分泌型磷脂A2(sPLA2)试剂盒Human HRG(Histidine-rich glycoprotein) ELISA Kit磷化周期检测点激2抗体

小鼠促胰液(SCT)试剂盒Human SMOX(Spermine oxidase) ELISA Kit周期依赖性激11抗体

小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)试剂盒Human SSTR2(Somatostatin receptor type 2) ELISA Kit周期依赖性激10

小鼠硒蛋白P(SEPP1)试剂盒Human CASP7(Caspase-7) ELISA Kit8号染色体开放阅读框86抗体

小鼠脑信号7A(SEMA7A)试剂盒Human NEFH(Neurofilament heavy polypeptide) ELISA Kit磷化分裂周期蛋白25B抗体

小鼠丝/苏蛋白磷(STK)试剂盒 Human AMOT(Angiomotin) ELISA Kit磷化分裂周期蛋白25B抗体

小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)试剂盒Human APLN(Apelin) ELISA Kit磷化半胱蛋白蛋白6抗体

小鼠Sestrin 1蛋白 (SESN1) 试剂盒Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA Kit9号染色体开放阅读框172抗体

小鼠Sestrin 2蛋白 (SESN2) 试剂盒Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit磷化P27抗体/周期依赖激抑制剂
PK丙酮酸激酶检测试剂盒微量法乙对酯 99%氢氧化 AR,90%Anti-Phospho-Beta-Catenin (Ser552)  磷化β 连环蛋白抗体

1-亚硝基吡咯烷 99%氢氧化 granules,AR,90%Anti-Phospho-Beta-Catenin (Ser675)  磷化β 连环蛋白抗体

4-肼基-7-硝基-2,1,3-并氧杂恶二唑 98%氢氧化钠 GR,97%,片状Anti-Phospho-Beta-Catenin (Thr41/Ser45)  磷化β 连环蛋白抗体

对壬基 分析标准品，异构体混合物氢氧化钠 颗粒状,AR,96%Anti-Cateninma gamma  gamma连环蛋白抗体

β-萘标准溶液 分析标准品，10 ng/μl活性炭口罩 三层无纺布，一层活性碳anti-Cathepsin B  组织蛋白B抗体

β-萘 分析标准品乙酰酮 GCS,≥99.6% (GC)Anti-DPP-I  组织蛋白C抗体

1-萘磷 99%乙酰酮 AR，99%anti-Cathepsin E  组织蛋白E抗体

烟 异构体总量：99%（剧品）乙酰酮 CP，98%Anti-Cathepsin D  组织蛋白D抗体