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植物硝态氮检测试剂盒可见分光光度法含量说明书
注意:正式测定之前选择预期差异大的样本做预测定。
规格:50T/48S
产品内容:
试剂一:粉剂×2 瓶,4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加 2mL 浓硫酸充分溶解。
试剂二:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存。
标准品:粉剂×1 瓶,4℃保存。10 mg 硝酸钾,临用前加入 1.386mL 蒸馏水溶解,配成 1000μg/mL的 NO3--N 标准液。
产品说明:
硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况,可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,硝基水杨酸在碱性条件下(PH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色深浅与含量成正比,可比色测定计算得硝态氮含量。
自备实验用品及仪器
蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
操作步骤:
1、样本处理
按照质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 蒸馏水)加入蒸馏水,室温匀浆后置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min,期间不断晃动或者置于 90℃恒温摇床中振荡提取 30min,待冷却后于 25℃,12000g 离心 15min,取上清待测。(深色植物匀浆后加入约 3mg 试剂三后再提取)
2、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 410nm,蒸馏水调零。
3、将 1000μg/mLNO3--N 标准液用蒸馏水 40 倍稀释成 25μg/mL 的标准溶液。
植物硝态氮检测试剂盒4、操作表:
试剂名称 | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
样本(μL) | 40 |
|
|
标准溶液(μL) |
| 40 |
|
蒸馏水(μL) |
|
| 40 |
试剂一(μL) | 60 | 60 | 60 |
充分混匀,25℃静置 30min | |||
试剂二(μL) | 1400 | 1400 | 1400 |
混匀,涡旋振荡,使出现的沉淀充分溶解,取 1mL 于 1mL 玻璃比色皿中测定 410nm 处吸光值 A,计算△A=A 测定管-A 空白管,△A 标准=A 标准管-A 空白管。 |
植物硝态氮检测试剂盒三、植物 NO3--N 的计算:
NO3--N 含量(μg/g 植物)=△A÷△A 标准×C 标准×V 提取÷W=25×△A÷△A 标准÷W。
W:样本质量,g;C 标准:标准溶液浓度,25μg/mL;V 提取:提取液体积,1mL。
注意事项:
1、 试剂一配制好后尽快使用,4℃可保存一周。
2、 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性,操作时需做好防护措施。
3、 △A 大于 1 时,建议将样品稀释后再进行测定。
4、 检出限为 62.8μg/g。植物硝态氮检测试剂盒