中性、碱性土壤速效磷试剂盒-微量法测定意义

速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷，土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。

测定原理

用弱碱性提取碱溶性磷和吸附态磷，用钼锑抗比色法测定。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、震荡仪。

中性、碱性土壤速效磷试剂盒-微量法试剂组成和配制

提取液：液体 105mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 6mL×1 支，4℃保存。

试剂二： 粉剂×1 支，4℃避光保存。临用前加 2mL 蒸馏水溶解。用不完的试剂 4℃保存。

试剂三： 粉剂×3 支，4℃避光保存。临用前加 1mL 蒸馏水溶解。现配现用。

样本处理

新鲜土样风干，过 30-50 目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为 1：20 的比例（建议称取约 0.05g 土样，加入 1mL 提取液），振荡提取 1h，10000g  ，25℃离心 10min，取上清液待测。

中性、碱性土壤速效磷试剂盒-微量法测定步骤

1、 显色液的配制（可测 50 个样）：取 EP 管一支，加入 660μL 试剂一，再加入 100μL 试剂二，充分混匀后，再加入 240μL 试剂三，充分混匀待用；配好的显色液应为黄色，若变蓝则为磷污染；显色液必须现配现用；若一次性测不了 50 个样，可按比例缩小各试剂体积。

2、 操作表

计算公式

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线：y = 0.1164x-0.012，R2  = 0.9958，x 为标准品浓度（mg/L），y 为吸光值。速效磷含量（mg/kg 干重）=（△A+0.012）÷ 0.1164×V 样÷（W×V 样÷V 样总）

= 8.591×（△A+0.012）÷W

V 样：加入反应体系中样本体积，0.04mL；V 样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量， 约 0.05g

b.用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 0.0582x-0.012，R2  = 0.9958，x 为标准品浓度（mg/L），y 为吸光值。

速效磷含量（mg/kg 干重）=（△A+0.012）÷ 0.0582×V 样÷（W×V 样÷V 样总）

= 17.182×（△A+0.012）÷W

V 样：加入反应体系中样本体积，0.04mL；V 样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量， 约 0.05g

中性、碱性土壤速效磷试剂盒-微量法注意事项

1.配好的显色液当天用完，变蓝则不能使用。

2.最/低检出限为 0.2μg/mL。