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还原剂兼容型 BCA 蛋白定量试剂盒250 次实验步骤产品及特点:
蛋白质样品的制备是 2D 电泳成功的关键,尤其是对植物材料,因为植物材料 不但有坚硬的细胞壁,还含有大量的、可以干扰 2D 电泳的物质(如多糖、脂类、 多酚、次生代谢物等)。本产品就是专门针对这一困难而开发,它有下列特点:
1. 可以处理各种植物材料(叶片、种子、果实等),包括新鲜或冻干的材料。
2. 操作简单,只有振荡和离心等简单步骤。 3. 能有效去除植物样品中常见的、干扰 2D 电泳的物质。
还原剂兼容型 BCA 蛋白定量试剂盒250 次实验步骤产品介绍:
规格及成分:
使用方法:
1、 称取 0.1-0.5g 植物组织(如果是叶片,一般用 0.2g 即可;如果是含水分多的 果实,一般用 0.3-0.5g;如果是种子,一般用 0.1g 即可),放入液氮中研磨 成粉末。
2、 加入 1 mL 溶液 A,在冰上继续研磨至成糊状。注意:如果样品富含蛋白酶, 还可以在溶液 A 中加入相应的蛋白酶抑制剂(自备)。
3、 将研磨液转移到一个干净的 1.5mL 塑料离心管中,颠倒混匀后 4℃ 15000g 离心 15 分钟。
4、 将上清液转移到一个新的 1.5mL 塑料离心管中。
5、 加入 100 uL 溶液 B,颠倒混匀。
6、 在冰上放置 15 分钟或在-20℃冰箱过夜。
7、 4℃ 15000g 离心 15 分钟,小心移弃上清液。
8、 向沉淀物加入 1mL -20℃预冷的溶液 C,震荡混合。
9、 4℃ 15000g 离心 10 分钟,移弃上清液。
10、重复步骤 8 和 9 一次
11、加入 1mL -20℃预冷的溶液 D,震荡混合后 4℃ 15000g 离心 10 分钟,去 净上清液。
12、冷冻干燥 1~2 分钟,沉淀即可放冰箱保存或加入 200uL 自备的等电聚焦上样 液在室温下(温度不要超过 30℃)溶解 30 分钟,再室温 10000g 离心 2 分 钟,将上清液转移到一个新的 1.5mL 塑料离心管中。后续试验包括 Bradford 蛋白定量和 2D 电泳。2D 电泳对蛋白上样量要求十分严格,因此强烈建议用 户在进行 2D 电泳前测定所得蛋白的浓度。
〖其他名称〗:酸性绿5;亮绿(淡黄);亮绿2G;亮绿S;亮绿2GN;酸性绿;黄色浅绿SF;淡绿SF淡黄;黄光亮绿;酸性绿 SF
〖CAS号〗:5141-20-8
C37H34N2O9S3Na2=792.85
〖级别〗:FMP
〖含量〗:≥85.0%
Em (Lambda Max, Water):>63500
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:深紫色或红棕色结晶或结晶粉末。易溶于水呈绿色溶液,加入盐酸则转为黄棕色,以后渐渐褪色。加入氢氧则几乎全部褪色,析出暗紫色沉淀。〖熔点〗288℃(分解),zui大吸收波长630(422)nm。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)用作细胞学上的复染色,或Gomori's步骤中用作苯胺兰的替代物。浆质染色剂。动物组织染色。与〖铁〗苏木素或其他核染料作对比染色。植物组织学中作细胞质和纤维染色。和酸性品红共染花粉管
〖保存〗:RT
萘酚绿B
〖英文名称〗:Naphthol green B;Acid green 1;Green PL;1-Nitroso-2-naphthol-6-sodium sulfonate ferric salt;Naphthol green;C.I. 10020
〖其他名称〗:酸性绿O;酸性绿I;颜料绿;媒染草绿;1-亚硝基-2-萘酚〖铁〗色淀;1-亚硝基-2-萘酚-6-磺酸钠〖铁〗盐;晒化绿B;萘酚绿BN ;三[5,6-二氢-5-(羟基亚氨)-6-氧代-2-萘磺酸(2-)-N5,O6]〖铁〗酸(III)三钠
〖CAS号〗:19381-50-1
C30H15FeN3Na3O15S3=878.47
〖级别〗:BS
生物染色试验:合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:深绿色粉末。溶于水呈黄绿色溶液,*存放分解。zui大吸收波长714nm。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)生物染色;测定镁的络合指示剂。萘酚绿B能与酸性铬蓝K组成了混合指示剂-KB指示剂,使其颜色变化更敏锐,由紫红变为蓝绿
〖保存〗:RT,避光
MgCl2溶液,25mM,PCR 5mL 聚乙二醇溶液
明胶溶液,2%,PCR 1.5mL 硫酸*
高 GC DNA 清除剂,PCR 1.5mL 碘化丙啶苯
MnCl2溶液,25mM,PCR 5mL 活性蓝 19
甲酰胺,PCR 5mL 马来酸钠
MgSO4溶液,10mM,PCR 5mL 硼氢化氰钠
石蜡油,PCR 10mL 乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺
DMSO,PCR 1.5mL 多聚 -L- 赖氨酸 (15-30 万 )
海藻糖溶液,1.5M,PCR 1.5mL 多聚 -L- 赖氨酸 (3-7 万 )
甜菜碱溶液,5M,PCR 1.5mL 多聚 -L- 赖氨酸 (7-15 万 )
绿如蓝染料,PCR 0.1mL D- 果糖 -6- 磷酸二钠
绿如蓝染料,PCR 1mL *抑制剂
dNTP 溶液 ,10mM 0.5mL Nα- 苯甲酰*乙酯
dNTP 溶液 ,10mM 5mL 二甲苯青
dNTP 溶液,2.5mM