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磷酸蛋白染色试剂盒10 次实验步骤产品介绍:
磷酸蛋白染色试剂盒10 次实验步骤规格及成分:
产品及特点:
蛋白质样品的制备是 2D 电泳成功的关键,尤其是对植物材料,因为植物材料 不但有坚硬的细胞壁,还含有大量的、可以干扰 2D 电泳的物质(如多糖、脂类、 多酚、次生代谢物等)。本产品就是专门针对这一困难而开发,它有下列特点:
1. 可以处理各种植物材料(叶片、种子、果实等),包括新鲜或冻干的材料。
2. 操作简单,只有振荡和离心等简单步骤。 3. 能有效去除植物样品中常见的、干扰 2D 电泳的物质。
使用方法:
1、 称取 0.1-0.5g 植物组织(如果是叶片,一般用 0.2g 即可;如果是含水分多的 果实,一般用 0.3-0.5g;如果是种子,一般用 0.1g 即可),放入液氮中研磨 成粉末。
2、 加入 1 mL 溶液 A,在冰上继续研磨至成糊状。注意:如果样品富含蛋白酶, 还可以在溶液 A 中加入相应的蛋白酶抑制剂(自备)。
3、 将研磨液转移到一个干净的 1.5mL 塑料离心管中,颠倒混匀后 4℃ 15000g 离心 15 分钟。
4、 将上清液转移到一个新的 1.5mL 塑料离心管中。
5、 加入 100 uL 溶液 B,颠倒混匀。
6、 在冰上放置 15 分钟或在-20℃冰箱过夜。
7、 4℃ 15000g 离心 15 分钟,小心移弃上清液。
8、 向沉淀物加入 1mL -20℃预冷的溶液 C,震荡混合。
9、 4℃ 15000g 离心 10 分钟,移弃上清液。
10、重复步骤 8 和 9 一次
11、加入 1mL -20℃预冷的溶液 D,震荡混合后 4℃ 15000g 离心 10 分钟,去 净上清液。
12、冷冻干燥 1~2 分钟,沉淀即可放冰箱保存或加入 200uL 自备的等电聚焦上样 液在室温下(温度不要超过 30℃)溶解 30 分钟,再室温 10000g 离心 2 分 钟,将上清液转移到一个新的 1.5mL 塑料离心管中。后续试验包括 Bradford 蛋白定量和 2D 电泳。2D 电泳对蛋白上样量要求十分严格,因此强烈建议用 户在进行 2D 电泳前测定所得蛋白的浓度。
〖英文名称〗:Azure II;,7-Bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium chloride mixt. with 3-(dimethylamino)-7-(methylamino)phenothiazin-5-ium chloride (1:1)
〖其他名称〗:蔚蓝II;天蓝II;亚甲天青Ⅰ;3,7-双(二甲基氨基)吩噻嗪-5-〖氯化物〗和3-(二甲基氨基)-7-(甲基氨基)吩噻嗪-5-〖氯化物〗混合物;氮杂脲II
〖CAS号〗:37247-10-2
C16H18ClN3S.C15H16ClN3S=625.68
〖级别〗:BS
生物染色试验:合格
干燥失量:≤7.5%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:深绿色粉末。系*与天青I的等量混合物。溶于水呈深蓝色,略溶于乙醇,微溶于氯方,不溶于乙迷。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
天青I
〖英文名称〗:Azure B;Azure I;C.I. 52010;3-Methylamino-7-dimethylaminophenothiazin-5-ium chloride
〖其他名称〗:天青B;亚甲天青;蔚蓝I ;亚甲基天青;氮杂脲I;3-二甲基氨基-7-甲基氨基吩噻嗪-5-翁〖氯化物〗;天蓝色B
〖CAS号〗:531-55-5
C15H16ClN3S=305.83
〖级别〗:BS
生物染色试验:合格
〖干燥失重〗:≤7.5%
cDNA 第二链合成试剂盒 30 次 荧光胺
一管式双链 cDNA 合成试剂盒 10 次 萘啶酮酸
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL 5μg 弹性蛋白酶 ( 猪胰 )
6nt 随机引物,0.5μg/μL 5μg 蛋白酶 K
10nt 随机引物,0.5μg/μL 5μg DEAE 葡聚糖凝胶 A-50
6nt 随机引物 ( 抗水解 ),0.5mM 100μL 5- 磷酸吡哆醛,一水
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq) 50 次 苏丹 B
两管式 RT-PCR 试剂盒 (AMV-Taq) 50 次 对硝基苯磷酸二钠盐
单酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (Tth) 50 次 萘酚 AS-TR 磷酸盐
50 次 氢