通用型 RT-LAMP 试剂盒50 次实验方法产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

通用型 RT-LAMP 试剂盒50 次实验方法合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

甲萘酚：合格
萘：合格
乙醇溶解试验：合格
水溶液反应：合格
〖灼烧残渣〗：≤0.05%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：白色或极浅黄色结晶性粉末或薄碎片。微有*气味。久贮或遇光色渐变深。加热升华。能随乙醇或水蒸气挥发。能还原氨性*。1g溶于1000ml水、80ml沸水、0.8ml乙醇、17ml氯方、1.3ml乙迷。溶于甘油、橄榄油和氢氧溶液。〖相对密度〗1.22。〖熔点〗121～123℃。沸点285～286℃。闪点161℃。zui大吸收波长(95％乙醇)226、265、275、286、320、331nm(ε91194、3911、4559、3301、1861、2163)。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)溴、氯、氯酸盐、铌、铜、亚硝酸盐和钾的检定。一氧化碳、铜、亚硝酸盐和钾的测定。烯丙醇、甲醇、氯方等的定性测定。酚磺转移酶的荧光测定底物。乙烯吸收剂。荧光指示剂。酸碱指示剂。
〖保存〗：RT，避光
乙二缩双（邻氨基酚）
〖英文名称〗：GBHA；Glyoxal-bis-(2-hydroxyanil)；Di-(o-hydroxyphenylimino)ethane；2,2′-(Ethanediylidenedinitrilo)diphenol
〖其他名称〗：乙二缩双邻羟苯胺；乙二双(2-羟基苯胺)；钙红；乙二缩双(邻氨基*)；乙二-双(2-羟基缩苯胺)；新钙试剂
〖CAS号〗：1149-16-2
C14H12N2O2=240.26
〖级别〗：CP
〖熔点〗：194～198℃
乙醇溶解试验：合格

BAY11-7082(NF-κB 抑制剂 )    Rosetta-gami(DE3) 菌种
Brefeldin A( 蛋白转运抑制剂 )    DH5α 菌种
Camptothecin( * )    柱式鼠尾 DNAout
Canavanine，sulfate(iNOS 抑制剂 )    热启动 Tth DNA 聚合酶
Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除剂 )    增强型天狼猩红染色试剂盒
Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除剂 )    茜素红 S 染色试剂盒
Ac-DEVD-CHO(Caspase3 抑制剂 )    超快核酸转膜试剂盒
Catalase( 抗氧化酶 )    Stbl3 感受态细胞
Catechin hydrate( 抗氧化剂 )    天净沙非同位素探针杂交试剂盒
Cisplatin(DNA 交联剂 / 细胞凋亡诱导剂 )    天净沙非同位素探针杂交试剂盒
Cycloheximide    HMS174（DE3）菌种
Cyclosporin A( 免疫抑制剂 /PP2B 抑制剂 )    柱式探针纯化试剂盒
Decitabine *