环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次说明书合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次说明书按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

产品介绍：

产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

茚三酮
〖英文名称〗：Ninhydrin；1,2,3-Indantrione hydrate；2,2-Dihydroxyinden-1,3-dione；2,2-Dihydroxy-1H-indene-1,3(2H)-dione；Triketohydrindene hydrate；Trioxohydrindene monohydrate
〖其他名称〗：苯并戊三酮；水合茚三酮；苯骈戊三酮；苯并环丙三酮；2,2-二羟基-1H-茚并-1,3(2H)-二酮；水合三酮氢茚；宁海群
〖CAS号〗：485-47-2
C9H6O4=178.14
〖级别〗：AR
〖含量〗：≥98.0%
水溶解试验：合格
对氨基酸灵敏度试验：合格
〖灼烧残渣〗：≤0.1%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：白色或浅黄色结晶或结晶性粉末。能吸湿结块。见光或露置空气中逐渐变色。在125℃变红，139℃体积膨胀，241℃分解。溶于水和乙醇，微溶于乙迷和氯方。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)测定蛋白质及肽的游离氨基及羧酸。

L-Arginine(NO 前体 )    EHA103 农杆菌菌种
L-Canavanine(iNOS 抑制剂 )    GV3101 农杆菌菌种
L-Citrulline(NO 中间体 )    BL21 菌种
Leptomycin B( 出核转运抑制剂 )    BJ5183 菌种
L-Glutathione (reduced form)( 抗氧化剂 )    Y187 酵母菌种
Lipoic acid( 抗氧化剂 )    Y2HGold 酵母菌种
L-NAME(eNOS 抑制剂 )    EGY48 酵母菌种
L-NMMA( 总 NOS 抑制剂 )    NMY51 酵母菌种
Lovastatin(HMG-CoA Reductase 抑制剂 )    *0F' 菌种
LPS(TLR4 激活剂 )    Rosetta-gami B(DE3) 菌种
LY294002(PI3K 抑制剂 )    Origami B 菌种
Metformin(LKB1-AMPK 激活剂 )    SMD1168H 酵母菌种
MG-132(Proteasome 抑制剂 )    WB600 枯草宿主菌菌种
Monensin ( 蛋白转运抑制剂 )    MG1655 菌种
NAC( 抗氧化剂 )    DH10Bac 菌种
KC 激活剂 )