单孢子全基因组扩增试剂盒30 次原理产品介绍：

单孢子全基因组扩增试剂盒30 次原理产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

〖保存〗：RT，避光
蒽酮
〖英文名称〗：Anthrone；9(10H)-Anthracenone；Carbothrone；Anthranone
〖其他名称〗：9,10-二氢-9-氧蒽；9(10H)-蒽酮；恩酮；9,10-二氫蒽-9-酮
〖CAS号〗：90-44-8
C14H10O=194.23
〖级别〗：AR
四录化碳溶解试验：合格
蒽醇：合格
对蔗糖灵敏度：合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：无色针状或黄色结晶。溶于丙同、苯等多数有机溶剂,不产生荧光,微溶于水。〖熔点〗155℃。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)测定体液中糖分、肝脏组织中的动物淀粉。
〖保存〗：RT
四丁基硫酸氢铵

Nicotinamide(Sirt1 抑制剂 )    X33 酵母菌种
Nocodazole( 有丝分裂抑制剂 )    1A75 枯草宿主菌菌种
NS-2028(sGC 抑制剂 )    BS168 枯草宿主菌菌种
NS-398(COX-2 抑制剂 )    SMD1163 酵母菌种
Nutlin-3(MDM2 拮抗剂 )    JM110 菌种
Okadaic acid 钾盐 (PP1 和 PP2A 抑制剂 )    HB2151 菌种
Paclitaxel(TAXOL)( * )    Tuner(DE3)plysS 菌种
PD 98059(MAPKK 抑制剂 )    AD494(DE3) 菌种
PDTC(NF-κB 抑制剂 / 抗氧化剂 )    BL21 SI 菌种
Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活剂 )     BL21-CodonPlus-RP 菌种
Pifithrin-a(p53 抑制剂 )    C41(DE3) 菌种
PMA/TPA (P