通用型全基因组扩增试剂盒30 次说明书产品介绍：

通用型全基因组扩增试剂盒30 次说明书产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

〖熔点〗：89～91℃
苯中溶解试：合格
〖灼烧残渣〗：≤0.1%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：有酮式和烯醇式两种异构体。烯醇式为浅黄色或黄色立方结晶或粉末。久置，烯醇式结构部分转变为白色结晶的酮式结构。在极性溶剂中亦会逐渐转变成酮式。溶于甲醇、乙醇、乙迷、甲烷和苯等有机溶剂,在碱性溶液中,能生成盐而溶解,不溶于水或酸性溶液。〖熔点〗(烯醇式) 86～88℃(92℃)、(酮式)122℃。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)分析化学、放射化学中用作萃取螯合剂,用于钢〖铁〗及有色金属中微量稀土元素总量测定。萃取、分离铀、钚、镅、镎和钍等金属。测定硝酸、亚硝酸和碘。
〖保存〗：RT
1-苯基-3-吡唑烷酮
〖英文名称〗：Phenidone；1-Phenyl-3-pyrazolidone；1-Phenyl-3-pyrazolidinone
〖其他名称〗：菲尼酮；菲尼酮A；3-甲基-1-苯基-吡唑啉-5-酮；1,3,5-吡唑酮；3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮；1-苯基-3-吡唑啉酮；1-苯基-3-氧-1,2-二氮杂茂；1-苯基-3-吡唑酮；1-苯-3-吡唑啉酮
〖CAS号〗：92-43-3
C9H10N2O=162.19
〖级别〗：试剂级
纯度：≥98.0%
〖熔点〗：119～122℃
氢氧溶解试验：合格

基因列表    Stb12 菌种
cDNA 克隆系列    Stb13 菌种
细胞株系列    Stb14 菌种
重组蛋白（非病毒）系列    SURE 菌种
重组蛋白（病毒）系列    TB1 菌种
常用PCR引物    TH1 菌种
非冻型组织 RNA 保存液    Tuner(DE3) 菌种
非冻型组织 RNA 保存液    Turbo 菌种
动物 RNAout(TRIzol)     XL1-Blue 菌种
动物 RNAout(TRIzol)     XL-10 gold 菌种
血液 RNAout     Y1089 菌种
克必隆 eTS 超